โครงสร้างพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์คอนโฟคอล
(1) โมดูลการสแกน
โมดูลการสแกนส่วนใหญ่ประกอบด้วยแถบแสงรูเข็ม (ควบคุมความหนาของชิ้นแสง) สเปกโตรสโคป (เปลี่ยนทิศทางของการแพร่กระจายของแสงตามความยาวคลื่น) คัลเลอริมิเตอร์เรืองแสงที่ปล่อยออกมา (การเลือกแสงภายในช่วงความยาวคลื่นที่กำหนดสำหรับการตรวจจับ) และ เครื่องตรวจจับ (หลอดโฟโตมัลติพลายเออร์) แสงฟลูออเรสเซนต์แบบผสมในตัวอย่างฟลูออเรสเซนต์จะเข้าสู่เครื่องสแกน และหลังจากถูกเลือกโดยแถบแสงรูเข็มตรวจจับ สเปกโตรมิเตอร์ และคัลเลอริมิเตอร์แล้ว ก็จะถูกแบ่งออกเป็นฟลูออเรสเซนซ์สีเดียวต่างๆ ซึ่งตรวจพบในช่องเรืองแสงต่างๆ และสร้างภาพคอนโฟคอลที่สอดคล้องกัน ในเวลาเดียวกัน สามารถแสดงภาพฟลูออเรสเซนซ์สีเดียวคู่ขนานหลายภาพและภาพประกอบของภาพเหล่านั้นบนหน้าจอคอมพิวเตอร์ได้
(2) ระบบกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์
กล้องจุลทรรศน์เป็นองค์ประกอบหลักของ LSCM ซึ่งเกี่ยวข้องกับคุณภาพการถ่ายภาพของระบบ เส้นทางแสงของกล้องจุลทรรศน์สามารถแทรกเข้าไปในระบบแสงที่อยู่ห่างออกไปอย่างไร้ขอบเขตได้อย่างง่ายดายด้วยตัวเลือกทางแสงโดยไม่ส่งผลกระทบต่อคุณภาพของภาพและความแม่นยำในการวัด วัตถุประสงค์ควรเป็นวัตถุประสงค์ apochromatic รูรับแสงแบบตัวเลขขนาดใหญ่ ซึ่งเป็นประโยชน์สำหรับการได้มาของแสงเรืองแสงและการถ่ายภาพที่ชัดเจน การแปลงกลุ่มเลนส์ใกล้วัตถุ การเลือกกลุ่มฟิลเตอร์สี การปรับการเคลื่อนไหวของระยะ และการล็อคหน่วยความจำของระนาบโฟกัส ทั้งหมดนี้ควรได้รับการควบคุมโดยอัตโนมัติโดยคอมพิวเตอร์
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ที่ใช้ในกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์โดยทั่วไปจะเหมือนกับกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ทั่วไป แต่มีลักษณะเฉพาะของตัวเอง: จำเป็นต้องเชื่อมต่อกับสแกนเนอร์เพื่อให้เลเซอร์สามารถเข้าสู่วัตถุประสงค์ของกล้องจุลทรรศน์เพื่อฉายรังสีตัวอย่างและทำให้ แสงเรืองแสงที่ปล่อยออกมาจากตัวอย่างไปถึงเครื่องตรวจจับ จำเป็นต้องมีอุปกรณ์แปลงเส้นทางแสง ซึ่งจะแปลงหลอดปรอทเป็นเลเซอร์ และสามารถปรับความเข้มแสงของหลอดปรอทได้
(3) เลเซอร์ทั่วไป
แหล่งกำเนิดเลเซอร์ที่ใช้ในกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ ได้แก่ ระบบเลเซอร์เดี่ยวและหลายเลเซอร์ และเลเซอร์ที่ใช้กันทั่วไปมีสามประเภทดังต่อไปนี้:
เซมิคอนดักเตอร์เลเซอร์: 405 นาโนเมตร (ใกล้เส้นสเปกตรัมอัลตราไวโอเลต)
เลเซอร์ไอออนอาร์กอน: 457nm, 477nm, 488nm, 514nm (แสงสีเขียวสีน้ำเงิน)
เลเซอร์ He-Ne: 543nm (เลเซอร์สีเขียว He-Ne สีเขียว) 633nm (เลเซอร์สีแดง He-Ne สีแดง)
เลเซอร์ยูวี (เลเซอร์ยูวี): 351 นาโนเมตร, 364 นาโนเมตร (แสงยูวี)
(4) อุปกรณ์เสริม
ระบบระบายความร้อนด้วยอากาศ ระบายความร้อนด้วยน้ำ และอุปกรณ์จ่ายไฟที่ได้รับการควบคุม
หลักการทำงานพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์คือการปล่อยแสงกระตุ้นความยาวคลื่นจำนวนหนึ่งจากเลเซอร์ก่อน หลังจากการขยายสัญญาณ แสงจะส่องผ่านแถบแสงรูเข็มที่ส่องสว่างในเครื่องสแกนเพื่อสร้างแหล่งกำเนิดแสงแบบจุด เลนส์ใกล้วัตถุจะโฟกัสไปที่ระนาบโฟกัสของตัวอย่าง และจุดที่ส่องสว่างที่สอดคล้องกันบนตัวอย่างจะตื่นเต้นและปล่อยแสงเรืองแสงออกมา หลังจากผ่านแถบไฟของช่องตรวจจับ มันจะไปถึงตัวตรวจจับและถูกถ่ายภาพบนหน้าจอตรวจสอบคอมพิวเตอร์ ด้วยวิธีนี้ ภาพคอนโฟคอลที่สมบูรณ์จะถูกสร้างขึ้นจากภาพเรืองแสงของแต่ละจุดของตัวอย่างบนระนาบโฟกัส ซึ่งเรียกว่าชิ้นแสง
