ความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์และกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลแบบเลเซอร์
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์
1. กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ใช้แสงอัลตราไวโอเลตเป็นแหล่งกำเนิดแสง ซึ่งใช้ในการฉายรังสีวัตถุที่ตรวจพบเพื่อให้เปล่งแสงเรืองแสง จากนั้นสังเกตรูปร่างและตำแหน่งของวัตถุใต้กล้องจุลทรรศน์ กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ใช้เพื่อศึกษาการดูดซึม การขนส่ง การกระจายตัว และตำแหน่งของสารเคมีในเซลล์ สารบางชนิดในเซลล์ เช่น คลอโรฟิลล์ สามารถเรืองแสงได้หลังจากถูกฉายรังสีอัลตราไวโอเลต สารอื่นๆ ไม่สามารถเรืองแสงได้ด้วยตัวเอง แต่สามารถเรืองแสงได้หลังจากย้อมด้วยสีย้อมเรืองแสงหรือแอนติบอดีเรืองแสงและฉายรังสีด้วยรังสีอัลตราไวโอเลต กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์เป็นหนึ่งในเครื่องมือสำหรับการวิจัยเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณเกี่ยวกับสารเหล่านี้
2 หลักการกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง:
(ก) แหล่งกำเนิดแสง: แหล่งกำเนิดแสงจะฉายแสงที่มีความยาวคลื่นต่างๆ (ตั้งแต่อัลตราไวโอเลตไปจนถึงอินฟราเรด)
(b) แหล่งกำเนิดแสงกรองการกระตุ้น: การส่งแสงที่มีความยาวคลื่นเฉพาะที่สามารถทำให้ตัวอย่างเรืองแสงได้ ขณะเดียวกันก็ปิดกั้นแสงที่ไม่มีประโยชน์สำหรับการเรืองแสงแบบกระตุ้น
(c) ตัวอย่างฟลูออเรสเซนต์: โดยทั่วไปจะย้อมด้วยเม็ดสีเรืองแสง
(d) ตัวกรองการปิดกั้น: การปิดกั้นแสงกระตุ้นที่ชิ้นงานไม่ดูดซับเพื่อเลือกส่งสารเรืองแสง และความยาวคลื่นบางส่วนในสารเรืองแสงก็จะถูกส่งแบบคัดเลือกเช่นกัน กล้องจุลทรรศน์ที่ใช้แสงอัลตราไวโอเลตเป็นแหล่งกำเนิดแสงเพื่อทำให้วัตถุที่ถูกฉายรังสีเปล่งแสงเรืองแสง กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนถูกประกอบครั้งแรกโดย Knohl และ Ha Roska ในกรุงเบอร์ลินเมื่อปี พ.ศ. 2474 กล้องจุลทรรศน์นี้ใช้ลำอิเล็กตรอนความเร็วสูงแทนลำแสง เนื่องจากความยาวคลื่นของการไหลของอิเล็กตรอนสั้นกว่าคลื่นแสงมาก กำลังขยายของกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนจึงสูงถึง 800 พันเท่า และขีดจำกัดความละเอียดขั้นต่ำคือ 0.2 นาโนเมตร กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดซึ่งเริ่มใช้ในปี พ.ศ. 2506 สามารถทำให้ผู้คนมองเห็นโครงสร้างเล็กๆ บนพื้นผิวของวัตถุได้
3. ขอบเขตการใช้งาน: ใช้เพื่อขยายภาพของวัตถุเล็กๆ โดยทั่วไปจะใช้กับการสังเกตชีววิทยา การแพทย์ และอนุภาคขนาดเล็กมาก
กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอล
1. กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลเพิ่มเลนส์กึ่งสะท้อนแสงบนเส้นทางแสงของแสงสะท้อน ซึ่งจะหักเหแสงสะท้อนที่ผ่านเลนส์ไปยังทิศทางอื่น ที่โฟกัส จะมีแผ่นกั้นที่มีรูเข็ม และรูเข็มอยู่ที่โฟกัส ด้านหลังแผ่นกั้นคือหลอดโฟโตมัลติพลายเออร์ สามารถจินตนาการได้ว่าแสงสะท้อนก่อนและหลังโฟกัสของแสงตรวจจับจะผ่านระบบคอนโฟคอลนี้ และจะไม่ถูกโฟกัสไปที่รูเล็กๆ แต่จะถูกบล็อกโดยแผ่นกั้น โฟโตมิเตอร์จึงวัดความเข้มของแสงสะท้อนที่โฟกัส
2. หลักการ: กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบบดั้งเดิมใช้แหล่งกำเนิดแสงจากสนาม และภาพของแต่ละจุดบนชิ้นงานจะถูกรบกวนโดยการเลี้ยวเบนหรือแสงที่กระเจิงของจุดที่อยู่ติดกัน กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์จะสแกนทุกจุดของระนาบโฟกัสในชิ้นงานทดสอบโดยใช้แหล่งกำเนิดแสงแบบจุดที่เกิดจากลำแสงเลเซอร์ที่ส่องผ่านรูเข็มส่องสว่าง จุดฉายรังสีบนชิ้นงานทดสอบจะถูกถ่ายภาพที่รูเข็มสำหรับการตรวจจับ ซึ่งจะได้รับทีละจุดหรือทีละจุดโดยหลอดโฟโตมัลติพลายเออร์ (PMT) หรืออุปกรณ์คัปเปิลเย็น (cCCD) หลังจากตรวจพบรูเข็ม และภาพฟลูออเรสเซนต์จะถูกสร้างขึ้นอย่างรวดเร็วบน หน้าจอมอนิเตอร์คอมพิวเตอร์ รูเข็มการส่องสว่างและรูเข็มการตรวจจับจะรวมกันโดยสัมพันธ์กับระนาบโฟกัสของเลนส์ใกล้วัตถุ และจุดบนระนาบโฟกัสจะเน้นที่รูเข็มการส่องสว่างและรูเข็มที่ปล่อยออกมาในเวลาเดียวกัน และจุดที่อยู่นอกระนาบโฟกัสจะไม่ ถ่ายภาพที่รูเข็มตรวจจับ เพื่อให้ภาพคอนโฟคอลที่ได้คือภาพตัดขวางทางแสงของชิ้นงานทดสอบ ซึ่งเอาชนะข้อบกพร่องของภาพเบลอของกล้องจุลทรรศน์ทั่วไป
3. สาขาที่สมัคร: เกี่ยวข้องกับการแพทย์ การวิจัยสัตว์และพืช ชีวเคมี แบคทีเรียวิทยา ชีววิทยาของเซลล์ เนื้อเยื่อและตัวอ่อน วิทยาศาสตร์การอาหาร พันธุศาสตร์ เภสัชวิทยา สรีรวิทยา ทัศนศาสตร์ พยาธิวิทยา พฤกษศาสตร์ ประสาทวิทยาศาสตร์ ชีววิทยาทางทะเล วัสดุศาสตร์ วิทยาศาสตร์อิเล็กทรอนิกส์ กลศาสตร์ ธรณีวิทยาปิโตรเลียม และแร่วิทยา
