ประโยชน์ของกล้องจุลทรรศน์มัลติโฟตอนแบบสแกนด้วยเลเซอร์ที่ได้รับการปรับปรุง
กล้องจุลทรรศน์มัลติโฟตอนแบบสแกนด้วยเลเซอร์เป็นการปรับปรุงที่สำคัญของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง โดยส่วนใหญ่ใช้สำหรับการสังเกตโครงสร้างลึกของเซลล์ที่มีชีวิต เซลล์และเนื้อเยื่อคงที่ และสามารถรับโครงสร้างระนาบ Z หลายชั้นที่ชัดเจนและคมชัด นั่นคือ ชิ้นแสง และสามารถสร้างได้ โครงสร้างสามมิติของชิ้นงานทดสอบ กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลใช้แหล่งกำเนิดแสงเลเซอร์ ซึ่งขยายให้เต็มระนาบโฟกัสด้านหลังของเลนส์ใกล้วัตถุ จากนั้นมาบรรจบกันเป็นจุดเล็กๆ บนระนาบโฟกัสของชิ้นงานทดสอบผ่านระบบเลนส์ของเลนส์ใกล้วัตถุ ขึ้นอยู่กับค่ารูรับแสงตัวเลขของเลนส์ใกล้วัตถุ เส้นผ่านศูนย์กลางของจุดส่องสว่างที่สว่างที่สุดจะอยู่ที่ประมาณ 0.25 ~ 0.8 μm และความลึกประมาณ 0.5 ~ 1.5 ไมโครเมตร ขนาดของจุดคอนโฟคอลขึ้นอยู่กับการออกแบบของกล้องจุลทรรศน์ ความยาวคลื่นเลเซอร์ คุณลักษณะของเลนส์ใกล้วัตถุ การตั้งค่าสถานะของชุดสแกน และลักษณะของชิ้นงานทดสอบ กล้องจุลทรรศน์ภาคสนามมีช่วงการส่องสว่างและความลึกที่กว้าง ในขณะที่กล้องจุลทรรศน์แบบคอนโฟคอลมีการส่องสว่างที่จุดโฟกัสบนระนาบโฟกัส ข้อได้เปรียบพื้นฐานที่สุดของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลคือสามารถแบ่งส่วนแสงอย่างละเอียดของชิ้นงานฟลูออเรสเซนต์หนาได้ (สูงถึง 50 μm หรือมากกว่า) โดยมีความหนาประมาณ 0.5 ถึง 1.5 μm ชุดภาพส่วนแสงสามารถรับได้โดยการเลื่อนชิ้นงานขึ้นและลงด้วยสเต็ปเปอร์มอเตอร์แกน Z ของกล้องจุลทรรศน์ การได้มาของข้อมูลภาพจะถูกควบคุมภายในระนาบที่แม่นยำ และจะไม่ถูกรบกวนโดยสัญญาณจากตำแหน่งอื่นบนชิ้นงานทดสอบ หลังจากลบผลกระทบของการเรืองแสงในพื้นหลังและเพิ่มอัตราส่วนสัญญาณต่อเสียงรบกวนแล้ว คอนทราสต์และความละเอียดของภาพคอนโฟคอลได้รับการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับภาพเรืองแสงในสนามแบบดั้งเดิม ในตัวอย่างจำนวนมาก ส่วนประกอบโครงสร้างที่ซับซ้อนจำนวนมากถูกเชื่อมโยงเข้าด้วยกันเพื่อสร้างระบบที่ซับซ้อน แต่เมื่อสามารถรวบรวมส่วนแสงได้เพียงพอ เราก็สามารถสร้างชิ้นส่วนเหล่านั้นขึ้นมาใหม่ในรูปแบบ 3 มิติผ่านซอฟต์แวร์ได้ วิธีการทดลองนี้มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยทางชีววิทยาเพื่ออธิบายความสัมพันธ์เชิงโครงสร้างและการทำงานที่ซับซ้อนระหว่างเซลล์หรือเนื้อเยื่อ
