ความรู้เบื้องต้นเกี่ยวกับหลักการพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟส
กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟสเป็นกล้องจุลทรรศน์พิเศษที่แปลงความแตกต่างของเส้นทางแสง (เช่น ความแตกต่างของเฟส) ที่เกิดขึ้นเมื่อแสงผ่านรายละเอียดของชิ้นงานโปร่งใสไปเป็นความแตกต่างของความเข้มของแสง
เมื่อแสงผ่านชิ้นงานที่ค่อนข้างโปร่งใส ความยาวคลื่น (สี) และแอมพลิจูด (ความสว่าง) ของแสงจะไม่เปลี่ยนแปลงอย่างเห็นได้ชัด ดังนั้น เมื่อสังเกตตัวอย่างที่ไม่มีรอยเปื้อน (เช่น เซลล์ของสิ่งมีชีวิต) ด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงธรรมดา ลักษณะทางสัณฐานวิทยาและโครงสร้างภายในจึงมักจะแยกแยะได้ยาก อย่างไรก็ตาม เนื่องจากดัชนีการหักเหของแสงและความหนาของส่วนต่างๆ ของเซลล์แตกต่างกัน เมื่อแสงผ่านชิ้นงานนี้ ความยาวเส้นทางแสงของแสงตรงและแสงที่เลี้ยวเบนจะแตกต่างกัน เมื่อความยาวเส้นทางแสงเพิ่มขึ้นหรือลดลง เฟสของคลื่นแสงที่เร็วขึ้นหรือล้าหลังจะเปลี่ยนแปลง (สร้างความแตกต่างของเฟส) ความแตกต่างของเฟสของแสงไม่สามารถสัมผัสได้ด้วยตาเปล่า แต่กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟสสามารถใช้อุปกรณ์พิเศษ - ไดอะแฟรมวงแหวนและแผ่นเฟสเพื่อใช้ปรากฏการณ์การรบกวนของแสงเพื่อแปลงความแตกต่างของเฟสของแสงให้เป็นความแตกต่างของแอมพลิจูด (แสงและ มืด) ที่สามารถตรวจพบได้ด้วยตามนุษย์ (ความแตกต่าง) เพื่อให้วัตถุโปร่งใสดั้งเดิมแสดงความแตกต่างที่ชัดเจนในด้านแสงและความมืด และเพิ่มคอนทราสต์ทำให้เราสังเกตเซลล์สิ่งมีชีวิตและส่วนประกอบภายในเซลล์ได้ชัดเจนยิ่งขึ้นซึ่งไม่สามารถมองเห็นหรือไม่สามารถมองเห็นได้ชัดเจนภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงธรรมดาและสนามมืด กล้องจุลทรรศน์ โครงสร้างจุลภาคบางอย่าง
หลักการถ่ายภาพของกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟส: แหล่งกำเนิดแสงสำหรับการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์สามารถผ่านวงแหวนโปร่งใสของไดอะแฟรมวงแหวนเท่านั้น จากนั้นคอนเดนเซอร์จะควบแน่นเป็นลำแสง เมื่อลำแสงนี้ผ่านวัตถุที่จะตรวจสอบ แสงจะแตกต่างกันเนื่องจากความยาวเส้นทางแสงที่แตกต่างกันของแต่ละส่วน ระดับการโก่งตัว (การเลี้ยวเบน) เนื่องจากภาพที่เกิดจากวงแหวนโปร่งใสเกิดขึ้นพร้อมกันกับระนาบโฟกัสด้านหลังของเลนส์ใกล้วัตถุและระนาบคอนจูเกตบนแผ่นเฟส ดังนั้น แสงตรงที่ไม่มีการเบนแสงจะผ่านพื้นผิวคอนจูเกต ในขณะที่แสงที่เบนเหน็บจะผ่านพื้นผิวการชดเชย เนื่องจากคุณสมบัติที่แตกต่างกันของพื้นผิวคอนจูเกตและพื้นผิวการชดเชยบนแผ่นเฟส พวกมันจะทำให้เกิดความแตกต่างของเฟสและความเข้มอ่อนลงในแสงที่ผ่านทั้งสองส่วนตามลำดับ จากนั้นแสงทั้งสองชุดก็มาบรรจบกันด้วยเลนส์ด้านหลังและกลับสู่เส้นทางแสงเดียวกัน การเดินทาง แสงตรงและแสงที่เลี้ยวเบนจะรบกวนซึ่งกันและกัน เปลี่ยนระยะต่างเฟสเป็นต่างกันแอมพลิจูด ด้วยวิธีนี้ ในระหว่างการใช้กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์แบบเฟส แสงที่ส่องผ่านวัตถุโปร่งใสไร้สีจะแปลงความแตกต่างของเฟสที่ดวงตามนุษย์ไม่สามารถแยกแยะได้ ให้กลายเป็นความแตกต่างของแอมพลิจูด (ความแตกต่างระหว่างแสงและความมืด) ที่สายตามนุษย์สามารถแยกแยะได้
