กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลแบบเลเซอร์ใช้แสงเลเซอร์เป็นแหล่งกำเนิดแสง
กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบบดั้งเดิมใช้แหล่งกำเนิดแสงจากสนาม และภาพของแต่ละจุดบนชิ้นงานจะถูกรบกวนโดยการเลี้ยวเบนหรือแสงที่กระเจิงของจุดที่อยู่ติดกัน กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลแบบเลเซอร์ใช้ลำแสงเลเซอร์เพื่อสร้างแหล่งกำเนิดแสงแบบจุดผ่านรูเข็มส่องสว่างเพื่อสแกนแต่ละจุดของระนาบโฟกัสของชิ้นงานทดสอบ และจุดฉายรังสีบนชิ้นงานจะถูกถ่ายภาพที่รูเข็มตรวจจับ ซึ่งได้รับการรับทีละจุด หรือทีละจุดหรือทีละเส้นตามท่อตัวคูณจุด (PMT) หรืออุปกรณ์เชื่อมต่อเย็น (cCCD) ด้านหลังรูเข็มตรวจจับ และสร้างภาพฟลูออเรสเซนต์บนหน้าจอคอมพิวเตอร์อย่างรวดเร็ว รูเข็มส่องสว่างและรูเข็มตรวจจับจะรวมกันโดยสัมพันธ์กับระนาบโฟกัสของเลนส์ใกล้วัตถุ จุดบนระนาบโฟกัสจะเน้นที่รูเข็มที่ส่องสว่างและรูเข็มที่เปล่งแสงในเวลาเดียวกัน จุดที่อยู่นอกระนาบโฟกัสจะไม่ถูกถ่ายภาพที่รูเข็มตรวจจับ ภาพคอนโฟคอลที่ได้รับในลักษณะนี้คือภาพตัดขวางเชิงแสงของชิ้นงานทดสอบ ซึ่งเอาชนะข้อบกพร่องของการเบลอของภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์ธรรมดา
กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลแบบเลเซอร์คือชุดของระบบสังเกตการณ์ การวิเคราะห์ และเอาต์พุตที่ใช้เลเซอร์เป็นแหล่งกำเนิดแสง ใช้หลักการและอุปกรณ์การโฟกัสแบบคอนจูเกตบนพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบบดั้งเดิม และใช้คอมพิวเตอร์ในการประมวลผลภาพดิจิทัลของวัตถุที่สังเกตได้ ความละเอียดของการถ่ายภาพด้วยแสงจะเพิ่มขึ้น 30 เปอร์เซ็นต์ ~ 40 เปอร์เซ็นต์ และใช้รังสีอัลตราไวโอเลตหรือแสงที่มองเห็นได้เพื่อกระตุ้นหัววัดฟลูออเรสเซนต์เพื่อให้ได้ภาพฟลูออเรสเซนต์ของโครงสร้างเล็กๆ ภายในเซลล์หรือเนื้อเยื่อ และเพื่อสังเกตสัญญาณทางสรีรวิทยาและการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ที่เซลล์ย่อย กลายเป็นเครื่องมือวิจัยยุคใหม่ในด้านสัณฐานวิทยา อณูชีววิทยา ประสาทวิทยาศาสตร์ เภสัชวิทยา พันธุศาสตร์ เป็นต้น






