การดีบักด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบ่งออกเป็นขั้นตอนเหล่านี้
เพื่อให้แน่ใจว่าขอบเขตการมองเห็นของกล้องจุลทรรศน์สามารถส่องสว่างได้ทั่วถึงและทั่วถึง จะต้องปรับระบบแสงส่องสว่างเมื่อติดตั้งและแก้ไขข้อบกพร่องของกล้องจุลทรรศน์เป็นครั้งแรก นี่เป็นวิธีที่สำคัญและเป็นวิธีพื้นฐานที่สุดในการใช้กล้องจุลทรรศน์อย่างถูกต้องและได้ผลลัพธ์ที่ถูกต้องและเชื่อถือได้ ความต้องการ. นอกจากนี้ การควบคุมการปรับระบบทางเดินแสงของแสงอย่างถูกต้องเป็นขั้นตอนที่จำเป็นหลังจากเปลี่ยนหลอดไฟแหล่งกำเนิดแสงระหว่างการใช้กล้องจุลทรรศน์ และยังเป็นวิธีที่จำเป็นในการตรวจสอบประสิทธิภาพของกล้องจุลทรรศน์เป็นครั้งคราวในระหว่างวัน ใช้. การปรับระบบเส้นทางแสงของกล้องจุลทรรศน์โดยส่วนใหญ่ประกอบด้วยสี่รายการต่อไปนี้:
1. การปรับเบื้องต้นของโคมไฟแหล่งกำเนิดแสงในกล้องจุลทรรศน์
① ขั้นแรกให้เปิดเปลือกของห้องหลอดไฟ กดคลิปสปริงเพื่อติดตั้งหลอดฮาโลเจนลงในซ็อกเก็ต และหลีกเลี่ยงการสัมผัสโดยตรงกับหลอดไฟโดยใช้นิ้วระหว่างการติดตั้ง (คุณสามารถใช้ผ้านุ่มหรือกระดาษเพื่อแยกหลอดได้) ดังนั้น ไม่ทิ้งรอยนิ้วมือและสิ่งสกปรกอื่นๆ ไว้บนหลอดไฟ ซึ่งจะส่งผลต่อหลอดไฟ อายุการใช้งาน
②วางโคมไฟบนโต๊ะ หลังจากเปิดเครื่องแล้ว ใช้ไขควงพิเศษเพื่อปรับรูลูกบิดโฟกัสของโคมไฟ (ทำเครื่องหมาย "←→") เพื่อให้เส้นใยฉายบนผนัง 1-2 เมตรออกไปและภาพเส้นใยจะถูกปรับ จากนั้นปรับความสูงของหลอดไฟและปรับรูด้าย (ทำเครื่องหมาย "──") เพื่อให้ตำแหน่งของไส้หลอดเหมาะสม จากนั้นปรับตำแหน่งซ้ายและขวาของหลอดไฟเพื่อปรับรูสกรู (ที่มีเครื่องหมาย "──") เพื่อให้ตำแหน่งซ้ายและขวาของไส้หลอดเหมาะสม
2. วัตถุประสงค์ของการตรวจสอบและแก้ไขตำแหน่งของแหล่งกำเนิดแสงส่องสว่าง (ฟิลาเมนต์) ในกล้องจุลทรรศน์คือการปรับปลายภาพของแสงให้ตรงกับระยะการมองเห็นของเลนส์ใกล้วัตถุ และเพื่อให้แน่ใจว่าขอบเขตการมองเห็นของ กล้องจุลทรรศน์จะส่องสว่างอย่างเต็มที่และสม่ำเสมอจากมุมมองของแหล่งกำเนิดแสง การจัดแสงซึ่งเป็นข้อกำหนดเบื้องต้นสำหรับการปรับระบบไฟส่องสว่างของ Kuhler เครื่องมือพื้นฐานที่จำเป็น: กล้องโทรทรรศน์ตั้งศูนย์จะติดตั้งเมื่อซื้อกล้องจุลทรรศน์
① ถอดปลอกกระจกฝ้าออกจากตัวโคม แล้วใส่ตัวโคมกลับเข้าไปบนกล้องจุลทรรศน์
②เลือกเลนส์ใกล้วัตถุ 10× เปิดโปรแกรมแหล่งกำเนิดแสงเพื่อค้นหาตัวอย่างและโฟกัสให้ชัดเจน จากนั้นเปลี่ยนไปใช้เลนส์ใกล้วัตถุ 40× เพื่อโฟกัสตัวอย่างให้ชัดเจน (เลนส์ใกล้วัตถุ 40× สามารถมองเห็นภาพรวมของเส้นใยได้ );
③ เปิดไดอะแฟรมรูรับแสงและไดอะแฟรมฟิลด์ของคอนเดนเซอร์จนสุด
④ ถอดปลั๊กตาข้างใดข้างหนึ่งออก เปลี่ยนกล้องโทรทรรศน์ที่อยู่ตรงกลาง จับส่วนสีขาว แล้วยืดเลนส์ตาสีดำด้วยมืออีกข้างหนึ่ง แล้วคุณจะเห็นภาพเส้นใยในขอบเขตการมองเห็น
⑤ หากตำแหน่งของเส้นใยไม่เหมาะสม ให้ปรับรู "──" เพื่อปรับภาพเส้นใยในแนวนอน และปรับรู "──" เพื่อปรับภาพเส้นใยในแนวตั้งจนกว่าภาพเส้นใยจะอยู่ ปรับให้เต็มรูรับแสงของเลนส์ใกล้วัตถุรอบภาพของแสง;
⑥ หลังจากปรับแล้ว ให้ใส่ปลอกกระจกฝ้ากลับเข้าที่เดิม ถอดปลั๊กกล้องโทรทรรศน์ที่อยู่ตรงกลางออก และเปลี่ยนเลนส์ใกล้ตาสำหรับการปรับครั้งต่อไป การปรับช่องหลอดไฟแหล่งกำเนิดแสงที่กล่าวถึงข้างต้นภายนอกกล้องจุลทรรศน์และการตรวจสอบตำแหน่งของตัวแหล่งกำเนิดแสงภายในกล้องจุลทรรศน์จำเป็นต้องดำเนินการเมื่อติดตั้งและแก้ไขจุดบกพร่องของกล้องจุลทรรศน์เป็นครั้งแรกเท่านั้น และเมื่อเปลี่ยนหลอดไฟแล้ว และไม่สามารถปรับกล้องจุลทรรศน์แบบสุ่มเมื่อใช้กล้องจุลทรรศน์ ในกรณีที่เกิดความสับสนก็สามารถปรับกลับสู่สถานะเดิมตามขั้นตอนข้างต้น
3. การปรับระบบส่องสว่างของ Kohler ให้ถูกต้อง ภารกิจหลักอย่างหนึ่งของการปรับกล้องจุลทรรศน์ที่ถูกต้องคือการปรับระบบทางเดินแสงของแสง และกุญแจสำคัญคือการปรับระบบส่องสว่างของ Kohler สำหรับทุกคนที่ใช้กล้องจุลทรรศน์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งผู้ที่ทำโฟโตไมโครกราฟ พวกเขาควรมีความเข้าใจและเชี่ยวชาญในหลักการของระบบส่องสว่าง Kuhler และขั้นตอนการปรับเพื่อให้สามารถใช้งานฟังก์ชั่นของกล้องจุลทรรศน์และถ่ายภาพได้อย่างเต็มที่ ภาพที่ออกมาจะได้ผลลัพธ์ที่สม่ำเสมอและสมบูรณ์แบบยิ่งขึ้น หลักการของระบบไฟส่องสว่างของ Kohler นั้นเรียบง่าย: แสงที่ปล่อยออกมาจากจุดใดๆ บนไฟส่องสว่างของแหล่งกำเนิดแสงสามารถให้ความสว่างแก่ขอบเขตการมองเห็นของกล้องจุลทรรศน์ และแสงที่ปล่อยออกมาจากแต่ละจุดบนไฟส่องสว่างของแหล่งกำเนิดแสงจะถูกรวบรวมไว้ และในฟิลด์ จากมุมมองของกล้องจุลทรรศน์ จะได้การส่องสว่างที่สมบูรณ์และสม่ำเสมอ จุดประสงค์ของการปรับระบบแสงของ Kuhler คือเพื่อให้ได้แสงสว่างที่สม่ำเสมอและเพียงพอสำหรับขอบเขตการมองเห็นที่สังเกตได้ และเพื่อป้องกันไม่ให้แสงเล็ดลอดกระทบหรือรบกวนระบบภาพ เพื่อหลีกเลี่ยงการเกิดฝ้าบนฟิล์มระหว่างการถ่ายภาพ ส่วนประกอบที่จำเป็นสำหรับระบบไฟส่องสว่างของ Kohler แบบปรับค่าสูง: ไดอะแฟรมสนาม ระบบเลนส์คอนเดนเซอร์ที่ปรับได้บนแกน
① ใช้เลนส์ใกล้วัตถุ 10x และเลนส์ใกล้ตา 10x
② ใส่เลนส์ด้านหน้าของคอนเดนเซอร์เข้าไปในเส้นทางแสง ปรับไดอะแฟรมรูรับแสงไปที่ตำแหน่งปานกลาง (ไม่ใหญ่หรือเล็กเกินไป) จากนั้นยกคอนเดนเซอร์ไปที่ตำแหน่งบนสุด และปรับแท่นหมุนคอนเดนเซอร์ไปที่ช่องสว่าง "J" ตำแหน่ง
③ ปรับไดอะแฟรมฟิลด์ให้ต่ำที่สุด (0.1)
④ วางตัวอย่างชีวภาพที่ปิดสนิทไว้บนเวที เปิดแหล่งกำเนิดแสง และโฟกัสให้ชัดเจน
⑤ จะมีพื้นที่สว่างบางส่วนหรือจุดสว่างในขอบเขตการมองเห็น ซึ่งเป็นภาพที่เบลอของไดอะแฟรมฟิลด์ ซึ่งสามารถมองเห็นรายละเอียดของตัวอย่างได้อย่างชัดเจน นอกนั้นเป็นขอบเขตการมองเห็นที่มืดกว่าซึ่งอาจไม่จำเป็นต้องเห็นรายละเอียดของตัวอย่างชัดเจน
⑥ปรับคอนเดนเซอร์ลงเล็กน้อย เพื่อให้จุดสว่างในขอบเขตการมองเห็นค่อยๆ ลดลง และค่อยๆ กลายเป็นภาพหลายเหลี่ยมที่ชัดเจน ซึ่งเป็นภาพที่ชัดเจนของไดอะแฟรมฟิลด์
⑦โดยทั่วไป ภาพเหลี่ยมไม่ได้อยู่กึ่งกลางของขอบเขตการมองเห็น และจำเป็นต้องปรับสกรูที่อยู่ตรงกลางคู่ของคอนเดนเซอร์เพื่อปรับภาพเหลี่ยมของไดอะแฟรมของสนามให้อยู่ในตำแหน่งกึ่งกลาง
⑧ค่อย ๆ เปิดไดอะแฟรมของขอบเขตการมองเห็นเพื่อทำให้รูปหลายเหลี่ยมเป็นรูปหลายเหลี่ยมที่จารึกไว้ของขอบเขตการมองเห็น และตรวจสอบสถานะการจัดตำแหน่งเพิ่มเติม หากการจัดตำแหน่งไม่เหมาะสม ให้ปรับสกรูปรับตำแหน่งอย่างละเอียดต่อไป
⑨เปิดไดอะแฟรมของขอบเขตการมองเห็นเล็กน้อย เพื่อให้ภาพหลายเหลี่ยมหายไปบนขอบของขอบเขตการมองเห็น จนถึงขณะนี้ การปรับระบบส่องสว่างของ Kohler เสร็จสิ้นแล้ว หลังจากปรับระบบไฟของ Kohler แล้ว มุมมองทั้งหมดจะสว่างเท่ากัน และภาพที่ถ่ายด้วยไมโครกราฟจะสว่างและชัดเจนด้วยคอนทราสต์ปกติ ควรให้ความสนใจเป็นพิเศษกับสิ่งต่อไปนี้ในระหว่างการใช้งานในอนาคต:
ก. ไม่สามารถเปิดไดอะแฟรมฟิลด์ได้โดยพลการ แต่ไดอะแฟรมฟิลด์สามารถแคบลงได้เมื่อเลนส์ใกล้วัตถุหลายตัวเพิ่มขึ้น และสามารถขยายได้ด้วยการลดลงของเลนส์ใกล้วัตถุหลายเท่า
ข. ไม่อนุญาตให้ปรับตำแหน่งความสูงของคอนเดนเซอร์แบบสุ่ม มิฉะนั้น จะทำลายระบบไฟส่องสว่างของ Kuhler ที่ปรับไว้
ค. เมื่อใช้เลนส์ใกล้วัตถุที่มีขนาดต่ำกว่า 10x ควรวางเลนส์ด้านหน้าของคอนเดนเซอร์ให้พ้นเส้นทางออปติคัล และเมื่อใช้เลนส์ใกล้วัตถุขนาด 10x หรือสูงกว่า ควรวางเลนส์ด้านหน้าในเส้นทางออปติคัล
ง. สำหรับการประสานกันระหว่างเลนส์ใกล้วัตถุหลายตัวกับขนาดของไดอะแฟรมฟิลด์ ในการใช้งานจริง ไม่จำเป็นต้องปิดหรือเปิดไดอะแฟรมฟิลด์สำหรับการสังเกตทั่วไป แต่เมื่อทำการถ่ายภาพไมโครเพื่อหลีกเลี่ยงแสงเล็ดลอด ตรงกันข้ามกับภาพถ่าย การรบกวนของระบบ เพื่อให้สามารถถ่ายภาพได้สมบูรณ์แบบยิ่งขึ้น เมื่อใช้เลนส์ใกล้วัตถุของแต่ละหลาย ๆ ตัว ควรปรับไดอะแฟรมของฟิลด์ให้หายไปจากขอบของขอบเขตการมองเห็นที่สังเกตได้ ซึ่งค่อนข้าง งานซับซ้อน แต่ต้องทำ วิธีการที่ง่ายกว่าคือการปรับไดอะแฟรมฟิลด์ที่สอดคล้องกับเลนส์ใกล้วัตถุหลายตัวล่วงหน้า และทำเครื่องหมาย จากนั้นปรับโดยตรงไปยังตำแหน่งที่สอดคล้องกันตามเครื่องหมายเมื่อใช้งานในภายหลัง
4. การใช้ไดอะแฟรมรูรับแสงอย่างถูกต้อง เนื่องจากไดอะแฟรมรูรับแสงของคอนเดนเซอร์อาจส่งผลต่อความละเอียดของกล้องจุลทรรศน์ ดังนั้นควรใช้วิธีการใช้ที่ถูกต้องอย่างเชี่ยวชาญเมื่อใช้งาน ในอดีต เนื่องจากมีความเข้าใจไม่เพียงพอเกี่ยวกับไดอะแฟรมรูรับแสง จึงมักถูกมองว่าเป็นเครื่องมือในการปรับความสว่างของขอบเขตการมองเห็น แม้ว่าการปรับไดอะแฟรมรูรับแสงจะสามารถเปลี่ยนความสว่างของขอบเขตการมองเห็นได้ในระดับหนึ่ง แต่จะส่งผลโดยตรงต่อคอนทราสต์ คอนทราสต์ และความละเอียดของภาพ ดังนั้นควรหลีกเลี่ยงให้มากที่สุดในระหว่างการใช้งาน เพื่อทำหน้าที่เป็นไดอะแฟรมรูรับแสงของคอนเดนเซอร์ เพื่อให้ได้ความละเอียดที่ดีที่สุดระหว่างการสังเกต โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการถ่ายภาพไมโคร เมื่อเปลี่ยนเลนส์ใกล้วัตถุด้วยเลนส์หลายตัว หลังจากโฟกัสตัวอย่างให้ชัดเจนแล้ว ไดอะแฟรมรูรับแสงจะต้องมี ปรับ. ทำให้ขนาดเท่ากับ 2/3 ของรูรับแสงตัวเลข (ภาพรูรับแสงของเลนส์ใกล้วัตถุ) ของเลนส์ใกล้วัตถุที่ใช้ วิธีการปรับคือใช้กล้องโทรทรรศน์ที่อยู่ตรงกลางเพื่อโฟกัสที่วงแหวนความแตกต่างเฟสสีดำในมุมมอง ปรับไดอะแฟรมรูรับแสง และคุณจะเห็นภาพไดอะแฟรมรูรับแสงหลายเหลี่ยม จากนั้นปรับให้เท่ากับ 2/3 ของ ภาพรูรับแสงของเลนส์ใกล้วัตถุ นั่นคือ ระหว่างวงแหวนต่างเฟสสีดำ ระหว่างด้านนอกและด้านในของช่องมองภาพทรงกลม เพื่อความสะดวก ไดอะแฟรมรูรับแสงที่สอดคล้องกับเลนส์ใกล้วัตถุของแต่ละเลนส์สามารถปรับล่วงหน้าและทำเครื่องหมายเพื่อหลีกเลี่ยงการปรับใหม่ทุกครั้งที่ใช้งาน
