ขั้นตอนการทำพาราฟินสำหรับกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง
เพื่อให้ได้คอนทราสต์ของภาพในกระจกที่ดีขึ้น ควรป้องกันแสงที่เล็ดลอดมากเกินไปไม่ให้เข้าสู่ช่องกระจกสังเกตการณ์หรือพื้นที่ถ่ายภาพให้มากที่สุด เมื่อสังเกตผ่านเลนส์ใกล้ตาโดยมีวัตถุประสงค์การขยายที่แตกต่างกัน ไดอะแฟรมมุมมองภาพสามารถปรับได้เพื่อสร้างช่องกระจกเทียบหรือช่องกระจกมองภาพที่เกี่ยวข้องกันเล็กน้อย ภายหลัง; ในโฟโตไมโครกราฟีหรือการถ่ายภาพ CCD ดิจิตอล ไดอะแฟรมมุมมองภาพสามารถลดลงได้ตามกรอบของช่องมองภาพและพื้นที่การถ่ายภาพ CCD แต่อย่าหดตัวมากเกินไปจนทำให้มุมของภาพถูกตัด เมื่อใช้เลนส์น้ำมัน ยังสามารถซูมออกได้อย่างถูกต้อง
การตั้งค่ารูรับแสงตัวเลขคอนเดนเซอร์
ประการแรก ช่วงตัวเลขรูรับแสง (NA) ของเลนส์คอนเดนเซอร์ควรเท่ากับค่า NA ของเลนส์ใกล้วัตถุและทำเครื่องหมายด้วยมาตราส่วน NA จำเป็นต้องเติมน้ำมันที่ด้านบนสำหรับการตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์กำลังขยายสูง หน้าที่ของคอนเดนเซอร์รูรับแสงคือการให้แสงฉายที่โฟกัสอย่างมีประสิทธิภาพซึ่งสอดคล้องกับรูรับแสงตัวเลขของเลนส์ใกล้วัตถุ หากตั้งค่า NA ของเลนส์คอนเดนเซอร์ให้ใหญ่กว่า NA ของเลนส์ใกล้วัตถุ แสงบางส่วนจะสูญเสียไป หากตั้งค่า NA ของเลนส์คอนเดนเซอร์น้อยเกินไป แสงที่ฉายจะไม่เพียงพอ และเนื่องจากการเปลี่ยนแปลงของมุมออก ส่วนหนึ่งของแสงจะฉายรังสีไปยังชิ้นงานในแนวเฉียงและดูเหมือนมีการเลี้ยวเบน การมิเรอร์ ทั้งคู่จะลดความละเอียดของการมิเรอร์ ดังนั้นควรปฏิบัติตามหลักการตั้งค่าที่เกี่ยวข้องบางประการ ค่าเชิงประจักษ์คือการปรับภายใน 80--100 เปอร์เซ็นต์ของ NA ของเลนส์ใกล้วัตถุที่เกี่ยวข้องระหว่างการตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์ ขอแนะนำให้ตั้งค่าที่ 60-80 เปอร์เซ็นต์หรือ 70 เปอร์เซ็นต์ เพื่อให้ได้คอนทราสต์และระยะชัดลึกที่เหมาะสมยิ่งขึ้นในระหว่างการถ่ายภาพ - 80 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งหมายความว่าทุกครั้งที่คุณสลับไปมาระหว่างเลนส์ใกล้วัตถุที่มีกำลังขยายต่างกัน คุณต้องทำการปรับให้สอดคล้องกัน ในทางปฏิบัติ คุณยังสามารถทำการปรับแต่งอย่างละเอียดตามความหนาของชิ้นงานทดสอบและความลึกของการย้อมสี
การแก้ไขการครอบคลุมไม่ดี ความหนาของกระจกครอบมาตรฐานคือ {{0}}.17 มม. และความหนาของกระจกสไลด์คือ 1.0 มม. เนื่องจากการใช้กระจกครอบหรือกระจกสไลด์ที่ไม่เป็นไปตามมาตรฐานและความหนาที่ไม่เท่ากันของชิ้นส่วนและตัวยึด จะทำให้เกิดความแตกต่างในการครอบคลุม ซึ่งจะส่งผลต่อเลนส์ใกล้วัตถุ NA อย่างมาก คุณภาพของภาพสะท้อนในกระจก เพื่อแก้ไขการครอบคลุมที่ไม่ดี คอแก้ไข (CC) ได้รับการออกแบบมาบนเลนส์ใกล้วัตถุแบบอินเตอร์เฟอโรเมตริก 40x, 60x หรือ 20x โดยทั่วไปแล้วช่วงการแก้ไขคือ 011--0.23 มม. และเลนส์ใกล้วัตถุระยะการทำงานที่ยาวอาจถึง 2.0 มม. คุณควรเชี่ยวชาญในสาระสำคัญของการปรับ CC อย่างรอบคอบ มิฉะนั้นจะทำให้เกิดปัญหา โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อผู้ทดลองคนก่อนทำการสอบเทียบและการครอบคลุมตัวอย่างของผู้ทดลองคนถัดไปไม่สอดคล้องกัน วิธีคือ
ขั้นแรก ให้เลือก CC และจัดเส้นค่า 0.17 ให้ตรงกับเส้นเล็งตำแหน่ง และสังเกตว่าสามารถโฟกัสภาพสะท้อนในกระจกได้ชัดเจนหรือไม่ หากไม่ชัดเจน ให้หมุนวงแหวน CC ไปทางซ้ายและขวาจนกว่าภาพสะท้อนในกระจกจะดีที่สุด และยืนกรานที่จะเปลี่ยนชิ้นงานทุกครั้ง ควรทำการแก้ไขและปรับความครอบคลุมทุกครั้งเพื่อให้มั่นใจในคุณภาพของการตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์
