ข้อกำหนดสำหรับการเตรียมสไลด์กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์

Jul 05, 2024

ฝากข้อความ

ข้อกำหนดสำหรับการเตรียมสไลด์กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์

 

(1) สไลด์แก้ว
ความหนาของสไลด์ควรอยู่ระหว่าง 0.8 ถึง 1.2 มม. หากสไลด์หนาเกินไป ด้านหนึ่งจะดูดซับแสงได้มากขึ้น และในทางกลับกัน จะไม่ยอมให้แสงกระตุ้นจับบนชิ้นงานทดสอบ แผ่นกระจกต้องเรียบ มีความหนาสม่ำเสมอ และไม่มีสารเรืองแสงที่เกิดขึ้นเองอย่างเห็นได้ชัด บางครั้งจำเป็นต้องใช้สไลด์แก้วควอทซ์


(2) ฝาครอบกระจกสไลด์
ความหนาของกระจกครอบประมาณ 0.17 มม. และมีความเรียบ เพื่อเพิ่มแสงกระตุ้น สามารถใช้กระจกครอบสัญญาณรบกวนได้ นี่คือกระจกครอบที่ออกแบบมาเป็นพิเศษซึ่งมีสารหลายชั้น (เช่น แมกนีเซียมฟลูออไรด์) ซึ่งมีผลกระทบต่อการรบกวนแสงที่มีความยาวคลื่นต่างกันแตกต่างกัน ช่วยให้แสงเรืองแสงผ่านไปได้อย่างราบรื่น ในขณะที่แสงกระตุ้นการสะท้อนสามารถกระตุ้นชิ้นงานได้


(3) ตัวอย่าง
ชิ้นทิชชู่หรือสิ่งส่งตรวจอื่นๆ ไม่ควรหนาเกินไป หากมีความหนาเกินไป แสงกระตุ้นส่วนใหญ่จะถูกใช้ไปที่ส่วนล่างของชิ้นงานทดสอบ ในขณะที่ส่วนบนที่เลนส์ใกล้วัตถุสังเกตได้โดยตรงจะไม่ตื่นเต้นเต็มที่ นอกจากนี้ การทับซ้อนกันของเซลล์หรือการมาสก์สิ่งเจือปนอาจส่งผลต่อการตัดสิน


(4) ตัวแทนการปิดผนึก
กลีเซอรีนมักใช้เป็นสารช่วยยึดเกาะ ซึ่งจะต้องไม่มีการเรืองแสงที่เกิดขึ้นเอง ไม่มีสี และโปร่งใส ความสว่างของฟลูออเรสเซนซ์ค่อนข้างสว่างที่ pH 85-9.5 และไม่จางหายไปอย่างรวดเร็ว ดังนั้น ส่วนผสมที่เท่ากันของกลีเซอรอลและบัฟเฟอร์คาร์บอเนต 0.5mol/L ที่มีค่า pH 9.0-9.5 โดยทั่วไปจะใช้เป็นสารปิดผนึก


(5) น้ำมันกระจก
เมื่อใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์สนามมืดและกล้องจุลทรรศน์น้ำมันในการสังเกตตัวอย่าง ต้องใช้น้ำมันกระจก สามารถใช้น้ำมันกระจกชนิดพิเศษที่ไม่ใช่ฟลูออเรสเซนต์ได้ หรือใช้กลีเซอรอลแทนได้ สามารถใช้พาราฟินเหลวได้ แต่ดัชนีการหักเหของแสงต่ำและมีผลกระทบเล็กน้อยต่อคุณภาพของภาพ

 

3 Digital Magnifier -

ส่งคำถาม