พื้นฐานและองค์ประกอบโครงสร้างของกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ใช้จุดที่มีประสิทธิภาพการส่องสว่างสูงเพื่อฉายแสงที่มีความยาวคลื่นหนึ่ง (เช่น แสงอัลตราไวโอเลต 3650 นิ้ว หรือแสงสีม่วงน้ำเงิน 4200 นิ้ว) ผ่านระบบกรองเป็นแสงกระตุ้นเพื่อกระตุ้นสารเรืองแสงในชิ้นงานให้เปล่งแสงเรืองแสงของ สีต่างๆ หลังจากนั้นสังเกตผ่านการขยายของเลนส์ใกล้วัตถุและเลนส์ใกล้ตา ด้วยวิธีนี้ ภายใต้พื้นหลังที่มีคอนทราสต์สูง แม้ว่าฟลูออเรสเซนซ์จะอ่อนมาก แต่ก็สามารถระบุได้ง่ายและมีความไวสูง ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการวิจัยโครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์และองค์ประกอบทางเคมี โครงสร้างพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ประกอบด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงทั่วไปและอุปกรณ์เสริมบางอย่าง (เช่น แหล่งกำเนิดแสงจากหลอดฟลูออเรสเซนต์ ฟิลเตอร์กระตุ้น ตัวแยกลำแสงสองสี และฟิลเตอร์ปิดกั้น ฯลฯ) แหล่งกำเนิดแสงฟลูออเรสเซนต์—โดยทั่วไปใช้หลอดปรอทความดันสูงพิเศษ (50-200W) ซึ่งสามารถเปล่งแสงที่มีความยาวคลื่นต่างๆ ได้ แต่สารเรืองแสงแต่ละชนิดมีความยาวคลื่นกระตุ้นที่ทำให้เกิดการเรืองแสงที่แรงที่สุด ดังนั้น ตัวกรองการกระตุ้น ( โดยทั่วไป มีฟิลเตอร์กระตุ้นรังสีอัลตราไวโอเลต สีม่วง สีน้ำเงิน และสีเขียว) ซึ่งอนุญาตให้แสงกระตุ้นที่มีความยาวคลื่นหนึ่งผ่านและฉายรังสีไปยังชิ้นงานในขณะที่ดูดซับแสงอื่นๆ หลังจากที่สารแต่ละชนิดถูกฉายรังสีด้วยแสงกระตุ้น มันจะปล่อยแสงเรืองแสงที่มองเห็นได้ด้วยความยาวคลื่นที่ยาวกว่าความยาวคลื่นที่ฉายออกมาในเวลาอันสั้น การเรืองแสงมีความเฉพาะเจาะจงและโดยทั่วไปจะอ่อนกว่าแสงกระตุ้น ในการสังเกตการเรืองแสงเฉพาะ ต้องเพิ่มการปิดกั้น (หรือการยับยั้ง) ด้านหลังเลนส์ใกล้วัตถุและใช้ร่วมกับเลนส์ดังกล่าว
ความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงกับกล้องจุลทรรศน์ธรรมดา
1. วิธีการส่องสว่างมักจะเป็นแบบ episcopic กล่าวคือ ฉายแหล่งกำเนิดแสงบนตัวอย่างผ่านเลนส์ใกล้วัตถุ
2. แหล่งกำเนิดแสงคือแสงอัลตราไวโอเลต ความยาวคลื่นสั้นกว่า และความละเอียดสูงกว่ากล้องจุลทรรศน์ธรรมดา
3. มีฟิลเตอร์พิเศษสองอัน อันหนึ่งอยู่ด้านหน้าแหล่งกำเนิดแสงใช้เพื่อกรองแสงที่มองเห็น และอีกอันระหว่างเลนส์ใกล้ตาและเลนส์ใกล้วัตถุใช้เพื่อกรองรังสีอัลตราไวโอเลตเพื่อปกป้องดวงตามนุษย์
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ยังเป็นกล้องจุลทรรศน์แบบออปติคัลชนิดหนึ่ง ความแตกต่างที่สำคัญคือความยาวคลื่นกระตุ้นของทั้งสองนั้นแตกต่างกัน สิ่งนี้กำหนดความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงและกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงธรรมดาในแง่ของโครงสร้างและการใช้งาน
กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงเป็นเครื่องมือสำคัญในไซโตเคมีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ ประกอบด้วยส่วนประกอบหลัก เช่น แหล่งกำเนิดแสง ระบบแผ่นกรอง และระบบแสง คือการใช้แสงที่มีความยาวคลื่นหนึ่งเพื่อกระตุ้นชิ้นงานให้เปล่งแสงเรืองแสง และสังเกตภาพเรืองแสงของชิ้นงานโดยขยายเลนส์ใกล้วัตถุและระบบเลนส์ใกล้ตา
