ความรู้สำคัญเกี่ยวกับกล้องจุลทรรศน์ระยะชัดลึกพิเศษสามารถเรียนรู้ได้ในคราวเดียว
เนื่องจากระยะการทำงานของกล้องจุลทรรศน์ระยะชัดลึกพิเศษสามมิตินั้นน้อยมาก ทุกคนจึงต้องระมัดระวังเมื่อใช้เลนส์น้ำมันเพื่อป้องกันความเสียหายที่เกิดกับเลนส์บนเลนส์ใกล้วัตถุและกระจกตัวอย่างระหว่างการทำงาน
ขั้นตอนการใช้งานมักจะเป็นไปตามกระบวนการเริ่มจากเลนส์กำลังต่ำ จากนั้นไปที่เลนส์กำลังสูง และจากนั้นก็ไปที่เลนส์น้ำมัน หากคุณใช้เลนส์กำลังสูง ไม่จำเป็นต้องแปลงเป็นเลนส์กำลังต่ำแล้วเริ่มต้นใหม่ คุณสามารถแปลงเป็นเลนส์น้ำมันได้โดยตรง
หากกล้องจุลทรรศน์ที่คุณใช้มีฟังก์ชั่นป้องกันการตกหล่น ขณะใช้งาน ให้เติมน้ำมันซีดาร์หนึ่งหยดลงในสไลด์ภายใต้การสังเกต จากนั้นเลื่อนกล้องจุลทรรศน์น้ำมันลงไปที่หยดน้ำมันจนกระทั่งหยุดตกลง จากนั้นใช้การปรับแบบละเอียดเพื่อ ทำการปรับเปลี่ยนอย่างละเอียดจนกว่าจะได้ภาพวัตถุที่ชัดเจน และหากกล้องจุลทรรศน์ที่ใช้ไม่มีฟังก์ชั่นหยุดอัตโนมัติ หลังจากหยดน้ำมันซีดาร์ลงบนสไลด์แล้ว เมื่อเลื่อนเลนส์ใกล้วัตถุลง ควรมองจากด้านข้างและลดเลนส์ใกล้วัตถุลง เลื่อนไปจนกระทั่งสัมผัสกับสไลด์เล็กน้อย จากนั้นปรับขึ้นอย่างละเอียดจนกระทั่งโฟกัสถูกต้อง
หลักการทำงานของกล้องจุลทรรศน์สามมิติระยะชัดลึกพิเศษ:
1. การหักเหและดัชนีการหักเหของแสง:
แสงแพร่กระจายเป็นเส้นตรงระหว่างจุดสองจุดในตัวกลางไอโซโทรปิกสม่ำเสมอ เมื่อผ่านวัตถุโปร่งใสที่มีตัวกลางความหนาแน่นต่างกัน การหักเหจะเกิดขึ้น นี่เป็นเพราะความเร็วการแพร่กระจายของแสงที่แตกต่างกันในสื่อที่แตกต่างกัน เมื่อรังสีแสงที่ไม่ตั้งฉากกับพื้นผิวของวัตถุโปร่งใสตกกระทบกับวัตถุโปร่งใส (เช่น กระจก) จากอากาศ รังสีแสงจะเปลี่ยนทิศทางที่ส่วนต่อประสานของมันและสร้างมุมการหักเหของแสงตามปกติ
2. ประสิทธิภาพของเลนส์:
เลนส์เป็นองค์ประกอบทางแสงพื้นฐานที่ประกอบขึ้นเป็นระบบออพติคอลของกล้องจุลทรรศน์ระยะชัดลึกพิเศษสามมิติ เลนส์ใกล้วัตถุ ช่องมองภาพ คอนเดนเซอร์ และส่วนประกอบอื่นๆ ประกอบด้วยเลนส์เดี่ยวหรือหลายเลนส์ ตามรูปร่างที่แตกต่างกัน สามารถแบ่งออกได้เป็น 2 ประเภท ได้แก่ เลนส์นูน (เลนส์บวก) และเลนส์เว้า (เลนส์เนกาทีฟ)
เมื่อลำแสงรังสีขนานกับแกนลำแสงผ่านเลนส์นูนและตัดกันที่จุดใดจุดหนึ่ง จุดนี้เรียกว่า "โฟกัส" และระนาบที่ผ่านจุดตัดกันและตั้งฉากกับแกนลำแสงเรียกว่า "ระนาบโฟกัส" มีจุดโฟกัสอยู่สองจุด โฟกัสในพื้นที่วัตถุ-อวกาศเรียกว่า "โฟกัสวัตถุ-อวกาศ" และระนาบโฟกัสในนั้นเรียกว่า "ระนาบโฟกัสวัตถุ-อวกาศ" ในทางตรงกันข้าม การโฟกัสในพื้นที่ภาพ-พื้นที่เรียกว่า "โฟกัสพื้นที่ภาพ" ระนาบโฟกัสที่ เรียกว่า "ระนาบโฟกัสสี่เหลี่ยมจัตุรัสของภาพ"
หลังจากที่แสงผ่านเลนส์เว้า มันจะสร้างภาพเสมือนตั้งตรง ในขณะที่เลนส์นูนสร้างภาพจริงตั้งตรง ภาพจริงสามารถปรากฏบนหน้าจอได้ แต่ภาพเสมือนไม่สามารถทำได้
