วิธีการผสานของภาพถ่ายกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง

วิธีการผสานของภาพถ่ายกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง

เรามักจะเห็นในบทความว่าภาพถ่ายเรืองแสงจะแสดงในรูปแบบของการผสานดังที่แสดงในรูปด้านล่าง การผสานสามารถใช้เพื่อแยกแยะสัญญาณฟลูออเรสเซนต์สองสัญญาณ (หรือมากกว่า) ที่ตำแหน่งเดียวกันในเนื้อเยื่อหรือเซลล์ที่ทับซ้อนกัน วันนี้เราจะพูดถึงวิธีการรวมภาพถ่ายกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์~

1. หลักการพื้นฐาน

หลักการพื้นฐานคือการคำนวณข้อมูลสีของพิกเซลที่ตำแหน่งเดียวกันบนแผ่นขนาดเท่ากันสองแผ่น (หรือมากกว่า) ใหม่ตามสูตรเพื่อให้ได้สีใหม่ ตัวอย่างเช่น สีแดงและสีเขียวของภาพถ่ายเรืองแสงซ้อนทับกันทำให้เป็นสีเหลือง อัลกอริทึมนี้ขึ้นอยู่กับ "โหมดเพิ่มเติม" RGB (ดังแสดงในรูปด้านล่าง) ซึ่งเกือบจะเหมือนกับ "สีหน้าจอ" โหมดเลเยอร์ฟิวชั่นของ Photoshop

2. การแนะนำซอฟต์แวร์

วันนี้ผมจะแนะนำซอฟต์แวร์ที่ใช้กันทั่วไปในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์: ImageJ การใช้มันเพื่อรวมรูปภาพนั้นง่ายกว่าและตรงกว่าการใช้ PS (ไม่ต้องกังวลกับเลเยอร์หรือโหมดเลเยอร์) ไม่จำเป็นต้องติดตั้ง ImageJ และสามารถเปิดและใช้ซอฟต์แวร์ในแฟลชไดรฟ์ USB ได้ เพื่อความสะดวกสบายของคุณ

โดยทั่วไปมีสองวิธีในการรวมภาพถ่ายเรืองแสง วิธีหนึ่งคือการใช้ซอฟต์แวร์ที่ตรงกับกล้องจุลทรรศน์เพื่อรวมเข้าด้วยกัน และอีกวิธีหนึ่งคือการบันทึกภาพถ่ายเรืองแสงที่สอดคล้องกับไฟกระตุ้นต่างๆ ในขอบเขตการมองเห็นเดียวกัน เมื่อแสดงผล ให้ใช้ซอฟต์แวร์ประมวลผลภาพทั่วไป (เช่น PS) เพื่อผสาน หากคุณกังวลเกี่ยวกับการดับของแสงเรืองแสงเมื่อดูที่กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง (โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อย้อมด้วยสีย้อมเรืองแสง) คุณสามารถถ่ายภาพจำนวนมากอย่างรวดเร็ว จากนั้นเลือกภาพถ่ายที่ดีเพื่อรวมเข้าด้วยกันเมื่อคุณย้อนกลับเพื่อแสดง ผลลัพธ์ ในเวลานี้ วิธีที่สองอาจมีความยืดหยุ่นและสงบมากขึ้น