กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์มีสองประเภทตามเส้นทางแสง:
1. กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบส่องผ่าน: แหล่งกำเนิดแสงกระตุ้นจะผ่านกระจกคอนเดนเซอร์ผ่านวัสดุตัวอย่างเพื่อกระตุ้นการเรืองแสง ตัวสะสมสนามมืดที่ใช้กันทั่วไป ยังสามารถใช้ตัวสะสมธรรมดา ปรับตัวสะท้อนแสงเพื่อให้แสงกระตุ้นส่งผ่านและบายพาสไปยังชิ้นงาน นี่คือกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบเก่า ข้อดีก็คือ แสงเรืองแสงจะแรงเมื่อใช้กำลังขยายต่ำ และข้อเสียคือ แสงเรืองแสงจะอ่อนลงตามกำลังขยายที่เพิ่มขึ้น ดังนั้นจึงควรสังเกตวัสดุตัวอย่างที่มีขนาดใหญ่กว่า
2. กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบตก (Falling-type fluorescence microscopy) เป็นกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ชนิดใหม่ที่ถูกพัฒนาขึ้นมาไม่นานนี้ และข้อแตกต่างคือการกระตุ้นของแสงจากเลนส์ใกล้วัตถุลงสู่พื้นผิวของชิ้นงานทดสอบ กล่าวคือ เป็นเลนส์ใกล้วัตถุตัวเดียวกับ การส่องสว่างของหัวรวมศูนย์และการรวบรวมเลนส์ใกล้วัตถุเรืองแสง จำเป็นต้องเพิ่มเส้นทางแสงลงในตัวแยกลำแสงสองสีซึ่งมีมุม 45 องศากับยูเรเนียมแสง แสงกระตุ้นจะสะท้อนเข้าสู่เลนส์ใกล้วัตถุ และรวมตัวกันในตัวอย่าง แสงเรืองแสงที่เกิดจากตัวอย่างและวัตถุประสงค์ พื้นผิวเลนส์ของเลนส์ ปิดการสะท้อนพื้นผิวกระจกของแสงกระตุ้นเข้าไปในเลนส์ใกล้วัตถุในเวลาเดียวกัน และกลับไปที่ตัวแยกลำแสงสองสี เพื่อให้แสงกระตุ้นและฟลูออเรสเซนต์ถูกแยกออกจากแสงกระตุ้นที่เหลือ จากนั้นถูกดูดซับโดย ตัวกรองการบล็อก หากคุณเปลี่ยนตัวกรองการกระตุ้น / ตัวแยกลำแสงสองสี / บล็อกรวมตัวกรองแบบบล็อกที่แตกต่างกัน จะสามารถตอบสนองความต้องการของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาเรืองแสงที่แตกต่างกันได้ ข้อดีของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์นี้คือขอบเขตการมองเห็นของการส่องสว่างที่สม่ำเสมอ การถ่ายภาพที่ชัดเจน ยิ่งกำลังขยายของฟลูออเรสเซนซ์มากเท่าไรก็ยิ่งแข็งแกร่งเท่านั้น
(B) วิธีกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์
1. เปิดแหล่งกำเนิดแสงหลอดปรอทความดันสูงพิเศษเพื่ออุ่นสักครู่เพื่อให้ถึงจุดที่สว่างที่สุด
2. ต้องติดตั้งกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบส่องผ่านระหว่างแหล่งกำเนิดแสงและหัวรวมศูนย์ที่จำเป็นในการกระตุ้นฟิลเตอร์ ที่ด้านหลังของเลนส์ใกล้วัตถุพร้อมกับฟิลเตอร์ปิดกั้นที่สอดคล้องกัน จะต้องสอดกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์แบบหล่นลงในช่องของเส้นทางแสงของตัวกรองการกระตุ้น / ตัวแยกลำแสงสองสี / ตัวกรองแบบปิดกั้นที่ต้องการ
3. สังเกตด้วยเลนส์ที่มีกำลังขยายต่ำและปรับศูนย์กลางของแหล่งกำเนิดแสงให้อยู่ตรงกลางจุดส่องสว่างทั้งหมดตามอุปกรณ์ปรับของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์รุ่นต่างๆ
4. วางชิ้นส่วนของชิ้นงานทดสอบ โดยสามารถสังเกตการโฟกัสได้ ใช้ควรใส่ใจกับ: จุดสิ้นสุดของการติดตั้งตัวกรองไม่ได้ใช้ตาเพื่อสังเกตโดยตรง เพื่อไม่ให้เกิดความเสียหายต่อดวงตา; ด้วยกระจกน้ำมันเพื่อสังเกตชิ้นงานคุณต้องใช้กระจกน้ำมันชนิดพิเศษที่ไม่เรืองแสง หลอดปรอทแรงดันสูงไม่สามารถเปิดใหม่ได้ทันทีหลังจากปิดหลอด คุณต้องเป็นเวลา 5 นาทีก่อนจึงจะสามารถเริ่มต้นใหม่ได้ มิฉะนั้นหลอดจะไม่เสถียรส่งผลต่ออายุการใช้งานของหลอดปรอท
(C) การสังเกต ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ในขั้นตอนการสอนที่มีตัวกรองแสงสีน้ำเงิน-ม่วง เซลล์ที่ย้อมด้วยสีย้อมฟลูออเรสเซนต์อะมิดินสีส้ม 0.01% สามารถมองเห็นได้ และนิวเคลียสและไซโตพลาสซึมของเซลล์รู้สึกตื่นเต้นที่จะผลิตสองเซลล์ที่แตกต่างกัน สีเรืองแสง (สีเขียวเข้มและสีส้มแดง)
