การสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์สามประเภท
I. สนามสว่าง BF (สนามสว่าง BF)
Bright field BF เป็นวิธีที่คุ้นเคยในการใช้กล้องจุลทรรศน์ ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านพยาธิวิทยาและการทดสอบเพื่อดูส่วนที่เปื้อน และกล้องจุลทรรศน์ทั้งหมดก็สามารถทำหน้าที่นี้ได้
สนามสดใส
ครั้งที่สอง ทุ่งมืด DF (สนามมืด DF)
Dark field DF จริงๆ แล้วคือแสงส่องสว่างในสนามมืด แตกต่างจากสนามสว่างตรงที่ไม่ได้สังเกตแสงที่ส่องสว่างโดยตรง แต่แสงสะท้อนหรือหักเหจากวัตถุที่กำลังตรวจสอบ ส่งผลให้ขอบเขตการมองเห็นกลายเป็นพื้นหลังสีเข้ม ในขณะที่วัตถุที่ตรวจสอบปรากฏเป็นภาพที่สว่าง
หลักการของขอบเขตการมองเห็นที่มืดนั้นขึ้นอยู่กับปรากฏการณ์ทินดัลล์ในทัศนศาสตร์ ฝุ่นในกรณีที่มีแสงจ้าผ่านแสงโดยตรง ไม่สามารถสังเกตดวงตาของมนุษย์ได้ เนื่องจากแสงจ้าที่อยู่รอบๆ สาเหตุ ถ้าแสงส่องไปที่มันอย่างเฉียง อนุภาคก็ดูเหมือนจะมีขนาดเพิ่มขึ้นเนื่องจากการสะท้อนของแสงและมองเห็นได้ด้วยตามนุษย์
อุปกรณ์เสริมพิเศษที่จำเป็นสำหรับการสังเกตในสนามมืดคือขอบเขตการมองเห็นในสนามมืด มีลักษณะพิเศษคือไม่อนุญาตให้ลำแสงส่องผ่านวัตถุที่ตรวจจากล่างขึ้นบน แต่เปลี่ยนเส้นทางของแสงให้เอียงไปทางวัตถุที่ตรวจอย่างเฉียง เพื่อให้แสงที่ส่องสว่างไม่เข้าสู่วัตถุโดยตรง เลนส์ใกล้วัตถุและภาพที่สว่างเกิดขึ้นจากการใช้แสงสะท้อนหรือหักเหจากพื้นผิวของวัตถุที่ตรวจ ความละเอียดของการสังเกตสนามมืดนั้นสูงกว่าการสังเกตสนามสว่างมาก * สูงถึง 0.02-0.004
ดาร์กฟิลด์
สาม. เฟสคอนทราสต์ PH
ในการพัฒนากล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง การประดิษฐ์ Phase Contrast PH ที่ประสบความสำเร็จถือเป็นความสำเร็จที่สำคัญในเทคโนโลยีกล้องจุลทรรศน์สมัยใหม่ ดังที่เราทราบ ดวงตาของมนุษย์สามารถแยกแยะได้เฉพาะความยาวคลื่น (สี) และแอมพลิจูด (ความสว่าง) ของคลื่นแสงเท่านั้น สำหรับตัวอย่างทางชีววิทยาที่ไม่มีสีและสว่าง เมื่อแสงผ่าน ความยาวคลื่นและแอมพลิจูดจะไม่เปลี่ยนแปลงมากนัก และเป็นเรื่องยาก เพื่อสังเกตชิ้นงานในการสังเกตสนามสว่าง
กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟสใช้ความแตกต่างของช่วงแสงของวัตถุที่ตรวจสอบสำหรับการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ นั่นคือ ใช้ปรากฏการณ์การรบกวนของแสงอย่างมีประสิทธิภาพเพื่อเปลี่ยนความแตกต่างของเฟสที่แยกไม่ออกของดวงตามนุษย์ให้กลายเป็นความแตกต่างของแอมพลิจูดที่แยกแยะได้ และแม้แต่ไม่มีสีและโปร่งใส สารต่างๆ สามารถมองเห็นได้ชัดเจน สิ่งนี้อำนวยความสะดวกในการสังเกตเซลล์ที่มีชีวิตอย่างมาก ดังนั้นกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟสจึงถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในกล้องจุลทรรศน์แบบกลับหัว
หลักการพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์แบบเฟสคือความแตกต่างของช่วงแสงของแสงที่มองเห็นที่ส่งผ่านชิ้นงานจะเปลี่ยนเป็นความแตกต่างของแอมพลิจูด ซึ่งจะเพิ่มความเปรียบต่างระหว่างโครงสร้างต่างๆ และทำให้มองเห็นได้ แสงจะหักเหผ่านชิ้นงานทดสอบและเบี่ยงเบนไปจากเส้นทางแสงเดิม โดยมีการหน่วงเวลา 1/4 แล (ความยาวคลื่น) หาก 1/4 แลนซ์ เพิ่มขึ้นหรือลดลงอีกครั้ง ความแตกต่างของช่วงแสงจะกลายเป็น 1/2 แลม และการรบกวนระหว่างลำแสงทั้งสองของการสังเคราะห์ด้วยแสงจะเพิ่มขึ้นหลังจากที่แกนของลำแสงทั้งสองถูกรบกวน และแอมพลิจูดเพิ่มขึ้นหรือลดลง ดังนั้น ปรับปรุงความคมชัด ในโครงสร้างกล้องจุลทรรศน์แบบเฟสคอนทราสต์มีคุณสมบัติพิเศษสองประการที่แตกต่างจากกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงทั่วไป:
1. ไดอะแฟรมวงแหวน (annulardiaphragm) ตั้งอยู่ระหว่างแหล่งกำเนิดแสงและคอนเดนเซอร์ บทบาทคือการทำให้แสงผ่านคอนเดนเซอร์เกิดเป็นกรวยแสงกลวงโดยเน้นที่ชิ้นงาน
2. แผ่นเฟส (แผ่นเฟสวงแหวน) ในเลนส์ใกล้วัตถุที่เคลือบด้วยแผ่นเฟสแมกนีเซียมฟลูออไรด์ แสงตรงหรือเลี้ยวเบนอาจทำให้เฟส 1/4 ล่าช้าได้ มีสองประเภท:
1. แผ่นเฟส: แสงตรงล่าช้า 1/4 แลม, คลื่นแสงสองกลุ่มเพิ่มคลื่นแสงร่วมแกน, แอมพลิจูดเพิ่มขึ้น, โครงสร้างชิ้นงานมากกว่าตัวกลางโดยรอบจะสว่างกว่า, การก่อตัวของคอนทราสต์ที่สดใส (หรือคอนทราสต์เชิงลบ) .
2.แผ่นเฟส B: แสงที่เลี้ยวเบนจะล่าช้า 1/4 แลมโบ คลื่นแสงทั้งสองกลุ่มหลังจากการรวมแกนของคลื่นแสงลดลง แอมพลิจูดจะเล็กลง การก่อตัวของคอนทราสต์สีเข้ม (หรือคอนทราสต์เชิงบวก ) โครงสร้างมีสีเข้มกว่าตัวกลางที่อยู่โดยรอบ
