อะไรคือความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟสและกล้องจุลทรรศน์ธรรมดา?
กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟสเป็นกล้องจุลทรรศน์ชนิดพิเศษที่แปลงความแตกต่างของเส้นทางแสง (เช่น ความแตกต่างของเฟส) ที่เกิดขึ้นเมื่อแสงผ่านรายละเอียดของชิ้นงานโปร่งใสไปเป็นความแตกต่างของความเข้มของแสง
เมื่อแสงผ่านชิ้นงานที่ค่อนข้างโปร่งใส ความยาวคลื่น (สี) และแอมพลิจูด (ความสว่าง) ของแสงจะไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่ชัดเจน ดังนั้นจึงเป็นเรื่องยากที่จะแยกแยะความแตกต่างระหว่างสัณฐานวิทยาและโครงสร้างภายในของชิ้นงานที่ไม่มีรอยเปื้อน (เช่น เซลล์ที่มีชีวิต) ด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงธรรมดา อย่างไรก็ตาม เนื่องจากดัชนีการหักเหของแสงและความหนาของแต่ละส่วนของเซลล์ที่แตกต่างกัน เส้นทางแสงของแสงตรงและแสงที่เลี้ยวเบนจะแตกต่างกันเมื่อแสงผ่านชิ้นงานนี้ เมื่อเส้นทางแสงเพิ่มขึ้นหรือลดลง ระยะของการเร่งหรือล้าหลังของคลื่นแสงจะเปลี่ยนไป (ทำให้เกิดความแตกต่างของเฟส) ความแตกต่างของเฟสของแสงไม่สามารถสัมผัสได้ด้วยตาเปล่า แต่กล้องจุลทรรศน์แบบแบ่งเฟสสามารถเปลี่ยนความแตกต่างของเฟสของแสงให้เป็นความแตกต่างของแอมพลิจูด (ความแตกต่างของแสง-ความมืด) ที่สายตามนุษย์สามารถรับรู้ได้ผ่านอุปกรณ์พิเศษของมัน ไดอะแฟรมวงแหวนและแผ่นเฟสเพื่อให้วัตถุโปร่งใสดั้งเดิมแสดงความแตกต่างระหว่างแสงและความมืดได้ชัดเจน และเพิ่มคอนทราสต์เพื่อให้เราสามารถสังเกตเซลล์ที่มีชีวิตและโครงสร้างที่ละเอียดอ่อนบางอย่างในเซลล์ที่ไม่สามารถมองเห็นหรือมองเห็นได้อย่างชัดเจน กล้องจุลทรรศน์แบบธรรมดาและกล้องจุลทรรศน์สนามมืด
หลักการถ่ายภาพของกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์แบบเฟส: ในระหว่างการตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์ แหล่งกำเนิดแสงสามารถผ่านวงแหวนโปร่งใสของไดอะแฟรมวงแหวนเท่านั้น และจะควบแน่นเป็นลำแสงหลังจากผ่านคอนเดนเซอร์ เมื่อลำแสงนี้ผ่านวัตถุที่ถูกตรวจสอบ ก็จะมีการเบน (หักเห) ในองศาที่ต่างกันเนื่องจากเส้นทางแสงที่แตกต่างกันของแต่ละส่วน เนื่องจากภาพที่เกิดจากวงแหวนโปร่งใสตกบนระนาบแบ็คโฟกัสของเลนส์ใกล้วัตถุ และเกิดขึ้นพร้อมกับระนาบคอนจูเกตบนเฟสเพลต ดังนั้น แสงตรงที่ไม่มีการโก่งตัวจะผ่านพื้นผิวคอนจูเกต ในขณะที่แสงที่หักเหที่มีการโก่งตัวจะผ่านพื้นผิวการชดเชย เนื่องจากคุณสมบัติที่แตกต่างกันของพื้นผิวคอนจูเกตและพื้นผิวการชดเชยบนแผ่นเฟส พวกมันจะสร้างความแตกต่างของเฟสตามลำดับและลดความเข้มของแสงที่ผ่านทั้งสองส่วนนี้ จากนั้นแสงทั้งสองกลุ่มจะมาบรรจบกันผ่าน เลนส์ด้านหลังและเดินทางบนเส้นทางแสงเดียวกันอีกครั้งเพื่อให้แสงตรงและแสงที่เลี้ยวเบนจะรบกวนกันและเปลี่ยนความแตกต่างของเฟสเป็นความแตกต่างของแอมพลิจูด ด้วยวิธีนี้ เมื่อใช้กล้องจุลทรรศน์แบบ Phase Difference ในการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ ความแตกต่างของเฟสที่ดวงตามนุษย์ไม่สามารถแยกแยะได้จะถูกแปลงเป็นความแตกต่างของแอมพลิจูด (ความแตกต่างของแสง-ความมืด) ที่สามารถแยกแยะได้ด้วยตามนุษย์ผ่านแสงจากลำตัวโปร่งใสไร้สี .






