อะไรคือความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์และกล้องจุลทรรศน์กลับหัว?
กล้องจุลทรรศน์เป็นเครื่องมือสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์และการทดลองอนุพันธ์ที่เกี่ยวข้อง ในปัจจุบันมีกล้องจุลทรรศน์หลายประเภทในท้องตลาด เป็นเรื่องท้าทายในการเลือกกล้องจุลทรรศน์ที่ตรงตามความต้องการและเหมาะสม ต่อไปนี้เป็นการแนะนำหลักการของกล้องจุลทรรศน์หัวกลับและกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ เพื่อให้คุณสามารถเลือกได้อย่างง่ายดาย
ส่วนประกอบของกล้องจุลทรรศน์กลับหัวจะเหมือนกับของกล้องจุลทรรศน์ทั่วไป และประกอบด้วยสามส่วนหลัก: ส่วนเชิงกล ส่วนส่องสว่าง และส่วนออปติก
ส่วนประกอบของกล้องจุลทรรศน์แบบกลับด้านจะเหมือนกับกล้องจุลทรรศน์แบบตั้งตรงทั่วไป ยกเว้นว่าเลนส์ใกล้วัตถุและระบบส่องสว่างจะกลับด้าน โดยอันแรกอยู่ใต้แท่นและอันหลังอยู่เหนือแท่น
โครงสร้างนี้ช่วยให้ระยะห่างที่มีประสิทธิภาพระหว่างระบบรวมแสงกับเวทีขยายได้อย่างมาก ซึ่งสะดวกสำหรับการวางวัตถุที่หนาขึ้นเพื่อให้สังเกตได้ เช่น จานเพาะเชื้อและขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ (แน่นอนว่า สไลด์แก้วก็เป็นที่ยอมรับเช่นกัน) ระยะการทำงานระหว่างกันไม่จำเป็นต้องมาก
กล้องจุลทรรศน์หัวกลับใช้สำหรับการสังเกตจุลินทรีย์ เซลล์ แบคทีเรีย การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ สารแขวนลอย ตะกอน ฯลฯ ในหน่วยงานทางการแพทย์และสาธารณสุข วิทยาลัยและมหาวิทยาลัย และสถาบันวิจัย สามารถสังเกตกระบวนการสืบพันธุ์และการแบ่งตัวของเซลล์และแบคทีเรียในอาหารเลี้ยงเชื้อได้อย่างต่อเนื่อง และสามารถถ่ายภาพกระบวนการนี้ได้ทุกรูปแบบ
มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านเซลล์วิทยา ปรสิตวิทยา เนื้องอกวิทยา ภูมิคุ้มกันวิทยา พันธุวิศวกรรม จุลชีววิทยาอุตสาหกรรม พฤกษศาสตร์ และสาขาอื่นๆ
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ใช้เพื่อศึกษาการดูดซึม การขนส่ง การกระจาย และการแปลตำแหน่งของสารเคมีในเซลล์
สำหรับวัตถุที่จะตรวจสอบ มีสองวิธีในการสร้างการเรืองแสง: การเรืองแสงอัตโนมัติ ซึ่งจะปล่อยการเรืองแสงโดยตรงหลังจากการฉายรังสีอัลตราไวโอเลต การเรืองแสงทุติยภูมิ ซึ่งสามารถเปล่งแสงฟลูออเรสเซนซ์หลังจากที่วัตถุที่จะสังเกตได้รับการบำบัดด้วยสีย้อมเรืองแสงแล้วฉายรังสีด้วยแสงอัลตราไวโอเลต
สารบางชนิดในเซลล์ เช่น คลอโรฟิลล์ จะผลิตสารเรืองแสงอัตโนมัติหลังจากถูกฉายรังสีด้วยรังสีอัลตราไวโอเลต สารบางชนิดไม่สามารถเรืองแสงได้ด้วยตัวเอง แต่ถ้าถูกย้อมด้วยสีย้อมเรืองแสงหรือแอนติบอดีเรืองแสง สารเหล่านี้ยังสามารถเปล่งแสงทุติยภูมิได้หลังจากฉายรังสีอัลตราไวโอเลต
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ใช้แหล่งกำเนิดแสงแบบจุดที่มีประสิทธิภาพการส่องสว่างสูง และปล่อยแสงที่มีความยาวคลื่นหนึ่ง (แสงอัลตราไวโอเลต 365 นาโนเมตร หรือแสงสีน้ำเงินม่วง 420 นาโนเมตร) ผ่านระบบกรองสีเป็นแสงกระตุ้น หลังจากกระตุ้นสารเรืองแสงในชิ้นงานที่จะเปล่งแสง ฟลูออเรสเซนต์สีต่างๆ แล้วสังเกตด้วยการขยายวัตถุและเลนส์ตา
ภายใต้พื้นหลังที่มีคอนทราสต์สูง แม้ว่าฟลูออเรสเซนซ์จะอ่อนมาก แต่ก็สามารถระบุได้ง่ายและมีความไวสูง ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการศึกษาโครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์และองค์ประกอบทางเคมี
