อะไรคือความแตกต่างระหว่าง Phase Contrast และกล้องจุลทรรศน์ธรรมดา?
กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์แบบเฟสเป็นกล้องจุลทรรศน์ชนิดพิเศษที่แปลงค่าความต่างการเคลื่อนที่ของแสง (เช่น ความต่างเฟส) ที่เกิดขึ้นเมื่อแสงผ่านรายละเอียดของชิ้นงานโปร่งใสไปเป็นค่าความเข้มแสงที่แตกต่างกัน
เมื่อแสงผ่านชิ้นงานที่ค่อนข้างโปร่งใส ความยาวคลื่น (สี) หรือแอมพลิจูด (ความสว่าง) ของแสงจะไม่เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญ เป็นผลให้สัณฐานวิทยาและโครงสร้างภายในของชิ้นงานที่ไม่มีรอยเปื้อน (เช่น เซลล์ที่มีชีวิต) มักจะแยกแยะได้ยากเมื่อมองด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงธรรมดา อย่างไรก็ตาม เนื่องจากดัชนีการหักเหของแสงและความหนาของส่วนต่างๆ ของเซลล์แตกต่างกัน จึงมีความแตกต่างในช่วงแสงของแสงตรงและแสงเลี้ยวเบนขณะที่มันผ่านชิ้นงานดังกล่าว เมื่อช่วงแสงเพิ่มขึ้นหรือลดลง ระยะของคลื่นแสงที่เร่งขึ้นหรือล้าหลังจะเปลี่ยนไป (สร้างความแตกต่างของเฟส) ดวงตาของมนุษย์ไม่สามารถรู้สึกถึงความแตกต่างของเฟสของแสงได้ แต่กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟสสามารถใช้ปรากฏการณ์การรบกวนของแสงผ่านอุปกรณ์พิเศษ - ไดอะแฟรมวงแหวนและแผ่นเฟส - เพื่อเปลี่ยนความแตกต่างของเฟสของแสงให้เป็นความแตกต่างใน แอมพลิจูด (แสงสว่างและความมืด) ที่สายตามนุษย์สามารถรับรู้ได้ จึงทำให้วัตถุโปร่งใสดั้งเดิมแสดงความแตกต่างที่ชัดเจนระหว่างแสงสว่างและความมืดและคอนทราสต์ที่เพิ่มขึ้นเพื่อให้เราสามารถ คอนทราสต์ได้รับการปรับปรุงเพื่อให้เราสามารถสังเกตสิ่งมีชีวิตได้ชัดเจนยิ่งขึ้น เซลล์และโครงสร้างเล็กๆ น้อยๆ ภายในเซลล์ที่ไม่สามารถมองเห็นได้ด้วยกล้องจุลทรรศน์ธรรมดาและกล้องจุลทรรศน์สนามมืด หรือไม่สามารถมองเห็นได้ชัดเจน
หลักการถ่ายภาพของกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟส: เมื่อตรวจสอบกระจก แหล่งกำเนิดแสงสามารถผ่านวงแหวนโปร่งใสของไดอะแฟรมวงแหวนเท่านั้น แล้วมาบรรจบกันเป็นลำแสงหลังจากหัวรวมแสง เมื่อลำแสงนี้ผ่านวัตถุที่ถูกตรวจสอบ เนื่องจากความแตกต่างในช่วงของส่วนต่างๆ ของแสง แสงจึงถูกหักเหไปเป็นองศาที่แตกต่างกัน (การเลี้ยวเบน) เนื่องจากภาพที่เกิดจากวงแหวนโปร่งใสตกลงบนระนาบโฟกัสพอดีหลังจากเลนส์ใกล้วัตถุและพื้นผิวคอนจูเกตของแผ่นเฟสซ้อนทับกัน ผลที่ได้คือ แสงตรงที่ไม่ถูกเบี่ยงเบนจะผ่านระนาบคอนจูเกต ในขณะที่แสงที่หักเหซึ่งถูกหักเหจะผ่านระนาบชดเชย เนื่องจากพื้นผิวคอนจูเกตบนแผ่นเฟสและชดเชยลักษณะที่แตกต่างกันของพื้นผิว พวกมันจะผ่านแสงทั้งสองส่วนนี้เพื่อสร้างความแตกต่างของเฟสและความเข้มของการลดทอนของแสงทั้งสองกลุ่ม จากนั้นหลังจากนั้น การบรรจบกันของเลนส์แล้วกลับมาอยู่ในแสงเดียวกันที่เดินทาง เพื่อให้แสงตรงและแสงที่เลี้ยวเบนทำให้เกิดการรบกวนของแสง เปลี่ยนความแตกต่างของเฟสสำหรับความแตกต่างของแอมพลิจูด ด้วยวิธีนี้ ในการตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟส แสงที่ผ่านตัวโปร่งใสไม่มีสีทำให้ตามนุษย์ต่างเฟสที่แยกไม่ออกในดวงตามนุษย์สามารถแยกแยะความแตกต่างของแอมพลิจูด (ความแตกต่างของแสงและความมืด)
