ความละเอียดของกล้องจุลทรรศน์แบบเลเซอร์คอนโฟคอลคืออะไร?
กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสีจริงและกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์นั้นโดยพื้นฐานแล้วเหมือนกันในหลักการถ่ายภาพ ความแตกต่างที่ใหญ่ที่สุดคือแหล่งกำเนิดแสงที่แตกต่างกัน
1. กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ แหล่งกำเนิดแสงของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์คือเลเซอร์ ซึ่งก็คือแสงสีเดียว กระบวนการถ่ายภาพจริงขึ้นอยู่กับความเข้มของแสงสะท้อนของเลเซอร์สีเดียวจากวัตถุที่สังเกต เนื่องจากเป็นการส่องสว่างด้วยแสงสีแบบสีเดียว จึงไม่สามารถแยกความแตกต่างของสีได้ สำหรับตัวอย่างเดียวกันในมุมมองเดียวกัน สีจะแตกต่างกัน แต่ไม่สามารถแยกความแตกต่างของเนื้อเยื่อหรือส่วนประกอบที่มีความเข้มแสงเท่ากันซึ่งสะท้อนจากเลเซอร์สีเดียวได้ เป็นเรื่องง่ายที่จะสร้างเฟสเดียวกันและสีต่างกัน สีเดียวกันและเฟสต่างกัน ปรากฏการณ์นี้ไม่เอื้อต่อการระบุโครงสร้างจุลภาคและองค์ประกอบที่ถูกต้อง
2. แหล่งกำเนิดแสงของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสีที่แท้จริงคือแหล่งกำเนิดแสงซีนอน ซึ่งก็คือแสงสีขาว กระบวนการถ่ายภาพที่แท้จริงคือการถ่ายภาพรูปร่าง (รวมถึงสี) ของวัตถุอย่างครอบคลุมภายใต้เงื่อนไขของแสงสีขาว เนื่องจากเป็นแสงหลายสี การส่องสว่างและการสร้างภาพ กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสีจริงจึงสามารถสะท้อนสีและรูปร่างของวัตถุได้อย่างแท้จริงมากขึ้น หลีกเลี่ยงปรากฏการณ์ของเฟสเดียวกันและสีต่างกัน และสีเดียวกันและเฟสต่างกันที่เกิดจากกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ ผู้สังเกตสามารถแยกแยะและตัดสินจากสี องค์ประกอบและการจัดกลุ่มตัวอย่าง ในแง่นี้ ความละเอียดของมันแข็งแกร่งกว่าการวิเคราะห์อย่างครอบคลุมของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์: ภายใต้เงื่อนไขการสังเกตของตัวอย่างที่มีความแตกต่างของสี กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสีจริงจะหลีกเลี่ยงกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ ปรากฏการณ์ของเฟสเดียวกันและสีต่างกัน สีเดียวกันและเฟสต่างกันเกิดขึ้น ผู้สังเกตสามารถแยกแยะและตัดสินองค์ประกอบและการจัดระเบียบของตัวอย่างผ่านสี ภายใต้เงื่อนไขนี้ ความละเอียดของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสีจริงจะสูงกว่าของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ ภายใต้เงื่อนไขการสังเกตของตัวอย่างสีเดียว ความละเอียดจะใกล้เคียงกับตัวบ่งชี้ทางเทคนิคที่เกี่ยวข้อง อย่างไรก็ตาม ในตัวอย่างที่สังเกตได้จริง เนื้อเยื่อและส่วนประกอบต่างๆ ส่วนใหญ่จะมีความแตกต่างของสี สอดคล้องกับสีไม่มีความแตกต่างหรือสำหรับตัวอย่างที่มีความแตกต่างของสีเล็กน้อย สามารถใช้การย้อมสีเทียม (เช่น การบำบัดการกัดกร่อน) เพื่อปรับปรุงความละเอียดของภาพได้ ในเรื่องนี้ กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ไม่มีอำนาจ นอกจากนี้ การแก้ปัญหาสามารถทำได้ภายใต้เงื่อนไขบางประการเท่านั้น เป็นตัวบ่งชี้ทางเทคนิค เมื่อไม่ตรงตามเงื่อนไขทางเทคนิคในการใช้งานจริง (อันที่จริง มักจะไม่เป็นไปตามนั้น) ความละเอียดของมันไม่ได้ขึ้นอยู่กับค่าที่กำหนด ภาพด้านล่างคือโลหะผสมนิกเกิลโครเมียม การถ่ายภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลและการเปรียบเทียบภาพที่เกิดขึ้นจากการใช้กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสีจริง ซึ่งวงกลมสีแดงคือการเจือสารประกอบต่างๆ คุณจะเห็นภาพที่เกิดขึ้นได้อย่างชัดเจน ด้วยกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลเลเซอร์สีเดียว เฉพาะสีเทา ระดับของความเข้มข้นไม่สามารถสะท้อนความแตกต่างระหว่างการเติมสารผสมได้อย่างแม่นยำ แต่คอนโฟคอลสีจริงสามารถแยกแยะความแตกต่างได้อย่างชัดเจน
