เหตุใดกำลังขยายของเลนส์น้ำมันจึงใหญ่กว่าเลนส์ใกล้วัตถุทั่วไป
เหตุผลที่ต้องแก้ไขแบคทีเรียก่อนย้อมสีในการทดลองทางจุลชีววิทยา:
1: ฆ่าเซลล์และทำให้สีย้อมกลายเป็นสีง่าย
สอง: ทำให้แบคทีเรียเกาะติดกับกระจกสไลด์และไม่ล้างออกง่ายด้วยน้ำ
เมื่อซ่อมให้แห้งช้าๆ หากคุณต้องการเร่งกระบวนการจริงๆ คุณสามารถทำให้แห้งได้ 2-3 ครั้งโดยให้ห่างจากเปลวไฟของตะเกียงแอลกอฮอล์ อย่าทำให้กระจกแห้งเพื่อให้ร้อน มิฉะนั้นอาจทำลายรูปแบบชีวิตของแบคทีเรียได้
คราบแกรมและการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ของแบคทีเรีย
หลักการทดลอง
หลักการของการย้อมสีแกรม: ปฏิกิริยาที่แตกต่างกันของแบคทีเรียต่อการย้อมสีแกรมนั้นเนื่องมาจากองค์ประกอบและโครงสร้างของผนังเซลล์ที่แตกต่างกัน ผนังเซลล์ของแบคทีเรียแกรมบวกส่วนใหญ่เป็นเครือข่ายของเพปทิโดไกลแคน เมื่อบำบัดด้วยเอธานอล ขนาดรูพรุนของโครงสร้างเครือข่ายจะเล็กลงเนื่องจากการคายน้ำ และความสามารถในการซึมผ่านลดลง ทำให้เกิดความซับซ้อนของผลึกไวโอเล็ตไอโอดีน สารนี้ไม่สามารถชะออกได้ง่ายและยังคงอยู่ในเซลล์ หลังจากการเปลี่ยนสีและการย้อมสีกลับแล้ว สีฟ้า-ม่วงของสีย้อมหลักจะยังคงอยู่ ผนังเซลล์ชั้น peptidoglycan ของแบคทีเรียแกรมลบมีความบางและมีปริมาณไขมันสูง ดังนั้นในระหว่างการลดสี ไขมันจะถูกละลายด้วยเอทานอล (หรืออะซิโตน) และความสามารถในการซึมผ่านของผนังเซลล์จะเพิ่มขึ้น ทำให้สารประกอบเชิงซ้อนของคริสตัลไวโอเล็ตไอโอดีน ค่อนข้างง่ายที่จะถูกชะออก หลังจากย้อมด้วยสีย้อมแล้ว เซลล์จะถูกย้อมด้วยสีแดงของสีย้อม หลักการถ่ายภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์: กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงธรรมดาสมัยใหม่ใช้ระบบเลนส์สองระบบ ได้แก่ เลนส์ใกล้ตาและเลนส์ใกล้วัตถุ ในการขยายภาพ จึงมักเรียกว่ากล้องจุลทรรศน์แบบผสม ในระบบออพติคอลของกล้องจุลทรรศน์ ประสิทธิภาพของเลนส์ใกล้วัตถุเป็นสิ่งสำคัญที่สุด เลนส์น้ำมันมีกำลังขยายที่ใหญ่ที่สุดและสำคัญที่สุดสำหรับการวิจัยทางจุลชีววิทยา วัตถุประสงค์หลักของการเติมน้ำมันเลนส์ระหว่างสไลด์และเลนส์คือเพื่อเพิ่มความสว่างของการส่องสว่างและเพิ่มความละเอียดของกล้องจุลทรรศน์ การใช้น้ำมันแทนอากาศเป็นตัวกลางในการแพร่กระจายแสงช่วยลดการหักเหหรือการสะท้อนของแสงทั้งหมด ทำให้ภาพที่สังเกตได้ชัดเจนยิ่งขึ้น
มองหาโคโลนีของแบคทีเรียที่จะสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์กำลังขยายต่ำ (เลื่อนสไลด์ต่อไป หากรู้สึกว่ามีเงาสีแดง ให้หยุดทันที ปรับกำลังขยาย หากไม่ใช่โคโลนี ให้มองต่อไป) ยกกระบอกเลนส์ขึ้น แล้วสลับไปที่เลนส์น้ำมัน หยดน้ำมันซีดาร์หนึ่งหยดลงในพื้นที่ตัวอย่าง และใช้ตัวปรับหยาบเพื่อค่อยๆ ลดกระบอกเลนส์ลง เพื่อให้เลนส์น้ำมันแช่อยู่ในน้ำมันของเลนส์และเกือบจะสัมผัสกับชิ้นงาน ยกคอนเดนเซอร์ไปที่ตำแหน่งสูงสุดแล้วเปิดรูรับแสง ใช้ตัวปรับหยาบเพื่อค่อยๆ ยกกระบอกเลนส์ขึ้นจนกระทั่งภาพของวัตถุปรากฏขึ้นในขอบเขตการมองเห็น และใช้ตัวปรับแบบละเอียดเพื่อให้ชัดเจนและอยู่ในโฟกัส
