เหตุผลที่ต้องได้รับการแก้ไขแบคทีเรียก่อนการย้อมสีในการทดลองด้วยกล้องจุลทรรศน์:
การฆ่าเซลล์นั้นง่ายกว่าที่สีย้อมจะเปื้อน
ทำให้แบคทีเรียยึดติดกับสไลด์แก้วและไม่ล้างออกด้วยน้ำได้อย่างง่ายดาย
เมื่อแก้ไขมีความจำเป็นที่จะต้องทำให้อากาศแห้งช้า หากจำเป็นต้องเพิ่มความเร็วในกระบวนการคุณสามารถทำให้แห้งได้สองสามครั้งจากระยะไกลเหนือเปลวไฟของโคมไฟแอลกอฮอล์ อย่าทำให้สไลด์แก้วแห้งจนกว่าจะร้อนขึ้นมิฉะนั้นอาจทำให้ชีวิตของแบคทีเรียเสียหายได้
การย้อมสีแกรมและการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ของแบคทีเรีย
หลักการทดลอง
หลักการของการย้อมสีแกรม: ปฏิกิริยาที่แตกต่างกันของแบคทีเรียต่อการย้อมสีแกรมเกิดจากความแตกต่างในองค์ประกอบและโครงสร้างของผนังเซลล์ ผนังเซลล์ของแบคทีเรียบวกแกรมส่วนใหญ่ประกอบด้วยเครือข่ายของ peptidoglycans เมื่อได้รับการรักษาด้วยเอทานอลการคายน้ำจะทำให้ขนาดรูขุมขนลดลงและการซึมผ่านของโครงสร้างเครือข่ายทำให้มันยากสำหรับคอมเพล็กซ์คริสตัลไวโอเล็ตที่จะล้างออกและเก็บไว้ภายในเซลล์ หลังจาก decolorization และ counterstaining สีม่วงสีน้ำเงินของสีย้อมเริ่มต้นยังคงอยู่ ชั้น peptidoglycan บนผนังเซลล์ของแบคทีเรียลบแกรมนั้นบางและมีปริมาณไขมันสูง ดังนั้นเมื่อมีการลดสีไขมันจะถูกละลายในเอทานอล (หรืออะซิโตน) เพิ่มการซึมผ่านของผนังเซลล์และทำให้ง่ายต่อการล้างสารไอโอดีนสีม่วงคริสตัล หลังจากพนันด้วย counterstain เซลล์จะถูกย้อมด้วยสีแดงของ counterstain หลักการถ่ายภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์: กล้องจุลทรรศน์ออปติคัลธรรมดาที่ทันสมัยใช้ระบบเลนส์สองชุดช่องมองภาพและเลนส์วัตถุประสงค์เพื่อขยายและภาพดังนั้นพวกมันจึงมักเรียกว่ากล้องจุลทรรศน์ผสม ในระบบออพติคอลของกล้องจุลทรรศน์ประสิทธิภาพของเลนส์วัตถุประสงค์เป็นสิ่งสำคัญที่สุดและการขยายของเลนส์น้ำมันนั้นสูงที่สุดซึ่งเป็นสิ่งสำคัญที่สุดสำหรับการวิจัยทางจุลชีววิทยา การเพิ่มน้ำมันเลนส์ระหว่างสไลด์แก้วและเลนส์เป็นหลักเพื่อเพิ่มความสว่างของแสงสว่างและเพิ่มความละเอียดของกล้องจุลทรรศน์ การใช้น้ำมันแทนอากาศเป็นสื่อกลางสำหรับการแพร่กระจายแสงช่วยลดการหักเหหรือการสะท้อนแสงทั้งหมดทำให้ภาพที่สังเกตเห็นได้ชัดเจนขึ้น
