ข้อดีของการปรับปรุงกล้องจุลทรรศน์มัลติโฟตอนแบบสแกนด้วยเลเซอร์
กล้องจุลทรรศน์มัลติโฟตอนแบบสแกนด้วยเลเซอร์เป็นการปรับปรุงที่สำคัญของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง โดยส่วนใหญ่แสดงให้เห็นในความสามารถในการสังเกตโครงสร้างส่วนลึกของเซลล์ที่มีชีวิต เซลล์คงที่ และเนื้อเยื่อ และได้โครงสร้างระนาบ Z- หลาย-ชั้น Z{1}} ที่คมชัดและคมชัด กล่าวคือ ชิ้นแสง ซึ่งสามารถใช้ในการสร้างโครงสร้างของแข็งสามมิติ-ของชิ้นงานทดสอบ กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลใช้แหล่งกำเนิดแสงเลเซอร์ ซึ่งขยายให้เต็มระนาบโฟกัสทั้งหมดของเลนส์ใกล้วัตถุ จากนั้นมารวมกันเป็นจุดเล็กๆ บนระนาบโฟกัสของชิ้นงานทดสอบผ่านระบบเลนส์ของเลนส์ใกล้วัตถุ ตามค่ารูรับแสงตัวเลขของเลนส์ใกล้วัตถุ เส้นผ่านศูนย์กลางของจุดส่องสว่างที่สว่างคือประมาณ 0.25-0.8 μ m และความลึกประมาณ 0.5-1.5 μ m ขนาดของจุดคอนโฟคอลถูกกำหนดโดยการออกแบบกล้องจุลทรรศน์ ความยาวคลื่นเลเซอร์ คุณลักษณะของวัตถุประสงค์ การตั้งค่าสถานะของหน่วยการสแกน และคุณสมบัติของชิ้นงานทดสอบ ช่วงการส่องสว่างและความลึกของกล้องจุลทรรศน์สนามนั้นมีมาก ในขณะที่การส่องสว่างของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลจะเน้นที่จุดโฟกัสบนระนาบโฟกัส ข้อได้เปรียบพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลคือสามารถแบ่งส่วนแสงอย่างละเอียดบนชิ้นงานฟลูออเรสเซนต์ที่มีความหนา (สูงถึง 50 μm หรือมากกว่า) โดยมีความหนาประมาณ 0.5 ถึง 1.5 μm ภาพชุดของชิ้นแสงสามารถรับได้โดยการเลื่อนชิ้นงานขึ้นและลงโดยใช้สเต็ปเปอร์มอเตอร์แกน Z- ของกล้องจุลทรรศน์ การรวบรวมข้อมูลภาพจะถูกควบคุมภายในระนาบ * * โดยไม่มีการรบกวนจากสัญญาณที่ส่งมาจากตำแหน่งอื่นบนชิ้นงานทดสอบ หลังจากขจัดอิทธิพลของแสงเรืองแสงในพื้นหลังและเพิ่มอัตราส่วนสัญญาณต่อสัญญาณรบกวนแล้ว คอนทราสต์และความละเอียดของภาพคอนโฟคอลได้รับการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับภาพเรืองแสงในสนามแบบดั้งเดิม ในตัวอย่างจำนวนมาก ส่วนประกอบโครงสร้างที่ซับซ้อนผสมผสานกันเพื่อสร้างระบบที่ซับซ้อน แต่เมื่อสามารถรวบรวมส่วนแสงได้เพียงพอ เราจึงสามารถใช้ซอฟต์แวร์เพื่อสร้างชิ้นส่วนเหล่านั้นขึ้นมาใหม่ในสามมิติ วิธีการทดลองนี้มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยทางชีววิทยาเพื่ออธิบายความสัมพันธ์เชิงโครงสร้างและการทำงานที่ซับซ้อนระหว่างเซลล์หรือเนื้อเยื่อ
