ความแตกต่าง ข้อดี และข้อเสียระหว่างกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบส่องผ่าน และกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบสะท้อน
1. กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบส่องผ่าน: แหล่งกำเนิดแสงกระตุ้นจะถูกส่งผ่านวัสดุตัวอย่างผ่านคอนเดนเซอร์เพื่อกระตุ้นการเรืองแสง หัววัดสนามมืดที่ใช้กันทั่วไปหรือหัววัดแบบธรรมดาสามารถใช้เพื่อปรับตัวสะท้อนแสงเพื่อแปลงแสงกระตุ้นและแสงด้านข้างไปที่ชิ้นงานทดสอบ นี่เป็นกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงที่ค่อนข้างล้าสมัย ข้อดีของมันคือการเรืองแสงที่รุนแรงที่กำลังขยายต่ำ ในขณะที่ข้อเสียคือ การเรืองแสงจะอ่อนลงเมื่อกำลังขยายเพิ่มขึ้น ดังนั้นจึงเป็นการดีกว่าสำหรับการสังเกตวัสดุตัวอย่างที่มีขนาดใหญ่กว่า
2. กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์แบบลำแสงตก: เป็นกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ชนิดใหม่ที่มีการพัฒนาในยุคปัจจุบัน ต่างจากครั้งก่อน แสงกระตุ้นจะตกลงมาจากเลนส์ใกล้วัตถุลงบนพื้นผิวของชิ้นงานทดสอบ โดยใช้เลนส์ใกล้วัตถุเดียวกันกับคอนเดนเซอร์ส่องสว่างและเลนส์ใกล้วัตถุเพื่อรวบรวมแสงเรืองแสง จำเป็นต้องเพิ่มตัวแยกลำแสงสีคู่ในเส้นทางแสง ซึ่งสร้างมุม 45 องศากับโฟโตยูเรเนียม แสงกระตุ้นจะสะท้อนเข้าสู่เลนส์ใกล้วัตถุและรวมตัวกันบนตัวอย่าง แสงฟลูออเรสเซนต์ที่สร้างโดยตัวอย่างและแสงกระตุ้นที่สะท้อนจากพื้นผิวของเลนส์ใกล้วัตถุและกระจกครอบจะเข้าสู่เลนส์ใกล้วัตถุพร้อมกันและกลับไปยังตัวแยกลำแสงสีคู่ เพื่อแยกแสงกระตุ้นและแสงฟลูออเรสเซนต์ จากนั้นแสงกระตุ้นที่ตกค้างจะถูกดูดซับโดยตัวกรองที่ปิดกั้น หากใช้ตัวกรองการกระตุ้น ตัวแยกลำแสงสีคู่ และตัวกรองบล็อกที่แตกต่างกัน สิ่งเหล่านี้จะสามารถตอบสนองความต้องการของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาเรืองแสงที่แตกต่างกันได้ ข้อดีของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์นี้คือ ขอบเขตการมองเห็นที่สม่ำเสมอ การสร้างภาพที่ชัดเจน และการเรืองแสงที่เข้มขึ้นด้วยกำลังขยายที่สูงกว่า
ข้อดีและข้อเสียของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบส่องผ่าน
แหล่งกำเนิดแสง: หลอดปรอทแรงดันสูงหรือหลอดฮาโลเจน
กระจกสปอตไลท์: การใช้สปอตไลท์สนามมืดเพื่อแยกการกระตุ้นและแสงฟลูออเรสเซนต์
เลนส์ใกล้วัตถุ: สามารถใช้เลนส์ใกล้วัตถุประเภทใดก็ได้
ตัวอย่าง: ชิ้นงานบางเหมาะสำหรับการสังเกตการส่งผ่านมากกว่า
ข้อดี: 1 เนื่องจากการใช้คอนเดนเซอร์สนามมืด แสงกระตุ้นจึงไม่สามารถเข้าสู่เลนส์ใกล้วัตถุได้ ทำให้ง่ายต่อการสร้างพื้นหลังที่มืดและให้คอนทราสต์ที่ดี และเลนส์ใกล้วัตถุใดๆ ก็สามารถใช้ในการสังเกตได้ ② เมื่อใช้วัตถุที่มีกำลังขยายต่ำ จะสว่างกว่ากล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบสะท้อนแสง
ข้อเสีย: ต้องปรับจุดศูนย์กลางและความสูงของสปอตไลท์ให้ถูกต้อง ไม่เช่นนั้นจะไม่สามารถรับภาพจากหลอดฟลูออเรสเซนต์ที่สว่างได้ เนื่องจากข้อจำกัดทางยาวโฟกัสของสปอตไลท์สนามมืด จึงไม่สามารถใช้กระจกสไลด์หนาได้ พื้นที่การส่องสว่างของขอบเขตการมองเห็นไม่ควรใหญ่เกินไป มิฉะนั้นอาจทำให้สีเรืองแสงของชิ้นงานฟลูออเรสเซนต์จางลง ชิ้นงานที่หนาหรือทึบแสงไม่เหมาะสม
ข้อดีและข้อเสียของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ชนิดสะท้อนแสง
แหล่งกำเนิดแสง: หลอดปรอทแรงดันสูงหรือหลอดฮาโลเจน
เลนส์โฟกัส: เนื่องจากเลนส์ใกล้วัตถุทำหน้าที่เป็นเลนส์โฟกัส จึงไม่จำเป็นต้องมีเลนส์โฟกัส
เลนส์ใกล้วัตถุ: เลนส์ใกล้วัตถุที่ใช้ต้องสามารถส่งแสงอัลตราไวโอเลตได้เพียงพอ และไม่ก่อให้เกิดแสงเรืองแสงในตัวเอง โดยไม่มีข้อจำกัดเรื่องรูรับแสงที่เป็นตัวเลข
ตัวอย่าง: สามารถสังเกตตัวอย่างทั้งหนาและทึบได้
ข้อดี: 1 เนื่องจากเลนส์ใกล้วัตถุยังทำหน้าที่เป็นสปอตไลท์ด้วย จึงไม่จำเป็นต้องปรับแต่งมากนัก 2 ด้วยการใช้วิธีการส่องสว่างแบบ Kolar คุณจะสามารถใช้เอฟเฟ็กต์ของรูรับแสงและรูรับแสงของมุมมองได้ รูรับแสงที่เป็นตัวเลขของเลนส์ใกล้วัตถุนั้นไม่จำกัด และยังสามารถได้ภาพที่มีความละเอียดสูงที่กำลังขยายสูง ตัวอย่างที่หนาหรือทึบแสงก็ได้เช่นกัน สังเกตได้และยังสามารถใช้สลิปปกหนาได้ วิธีการสังเกตอื่น ๆ ยังสามารถใช้ร่วมกับการสะท้อนแสงเรืองแสงได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งกับวิธีความแตกต่างของเฟสและวิธีการรบกวนการส่งผ่านที่แตกต่างกัน มันสามารถหลีกเลี่ยงปรากฏการณ์การซีดจางของสีเรืองแสงที่ไม่จำเป็น
ข้อเสีย: เมื่อใช้วัตถุที่กำลังขยายภาคพื้นดิน ภาพจะค่อนข้างมืด ดังนั้นจึงต้องใช้วัตถุที่มีรูรับแสงเป็นตัวเลขสูง ระบบกรองจะต้องแยกสารเรืองแสงและสารเรืองแสงออกจากกันอย่างมีประสิทธิภาพ,
