ขั้นตอนการทดลองวิธีการนับด้วยกล้องจุลทรรศน์ทางจุลชีววิทยาโดยตรง
1. การเจือจาง
สารแขวนลอย Saccharomyces cerevisiae เพื่อการเจือจางที่เหมาะสม ของเหลวจากแบคทีเรีย เช่น ชนิดไม่ข้น ไม่สามารถเจือจางได้
2. การตรวจสอบกระจกของห้องนับ
ก่อนที่จะเพิ่มตัวอย่าง ควรตรวจสอบห้องนับของแผ่นนับก่อน หากมีสิ่งสกปรกต้องทำความสะอาดก่อนนับ
3. การเติมตัวอย่าง
แผ่นฮีมาโตคริตที่สะอาดและแห้งปิดด้วยแผ่นปิด จากนั้นบิวเรตปากละเอียดปลอดเชื้อจะถูกเจือจางของเหลวยีสต์ของผู้ผลิตเบียร์จากขอบของแผ่นปิดหยด (ไม่ควรมากเกินไป) เพื่อให้ของเหลวแบคทีเรียตามช่องว่างโดยการแทรกซึมของเส้นเลือดฝอยเข้าไป ห้องนับ ห้องนับทั่วไปสามารถเต็มไปด้วยของเหลวแบคทีเรีย โปรดทราบว่าไม่ควรมีฟองอากาศ
4. การนับด้วยกล้องจุลทรรศน์
หลังจากพักเป็นเวลา 5 นาที ให้วางแผ่นนับเม็ดเลือดบนแท่นพาหะของกล้องจุลทรรศน์ ขั้นแรกให้ค้นหาตำแหน่งของห้องนับที่มีกำลังขยายต่ำ จากนั้นเปลี่ยนเป็นกำลังขยายสูงสำหรับการนับ หากพบว่าของเหลวจากแบคทีเรียมีความหนาหรือบางเกินไปก่อนที่จะนับ จำเป็นต้องปรับการเจือจางใหม่ก่อนที่จะนับ โดยทั่วไป การเจือจางตัวอย่างต้องใช้สิ่งมีชีวิตประมาณ 5-10 เซลล์ในแต่ละเซลล์ขนาดเล็ก สำหรับแต่ละห้องนับ สิ่งมีชีวิตในช่องกลาง 5 ช่อง (สามารถเลือกมุม 4 มุมและตรงกลางของช่องกลางได้) จะถูกนับ โดยทั่วไปแบคทีเรียที่อยู่บนเส้นตารางจะนับเฉพาะเส้นบนและเส้นขวาเท่านั้น ในกรณีของการเจริญเติบโตของยีสต์ จะนับสิ่งมีชีวิตสองชนิดหากร่างกายที่แตกหน่อมีขนาดเพียงครึ่งหนึ่งของเซลล์ต้นกำเนิด การนับตัวอย่างจากห้องนับทั้งสองห้องเพื่อนับค่าเพื่อคำนวณปริมาณแบคทีเรียในตัวอย่าง
5. การทำความสะอาดแผ่นฮีมาโตคริต
หลังการใช้งาน แผ่นนับเม็ดเลือดในกรงน้ำที่มีคอลัมน์น้ำล้าง ห้ามใช้วัตถุแข็งในการล้างและแปรง ซักและเป่าแห้งหรือเป่าให้แห้งด้วยเครื่องเป่าผม ตรวจสอบจานด้วยกล้องจุลทรรศน์และสังเกตว่ามีสิ่งมีชีวิตตกค้างหรือตะกอนอื่นๆ ในช่องเล็กๆ แต่ละช่องหรือไม่ ถ้าไม่สะอาดต้องซักซ้ำจนสะอาด
