การวัดปริมาตรบล็อคเนื้อเยื่อโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพ
จนถึงขณะนี้ การตรึงด้วยความเย็นจัด การแบ่งส่วนบางเฉียบ-แบบแช่แข็ง และการทำให้แห้งแบบแช่แข็ง- เป็นวิธีการประจำสำหรับกล้องจุลทรรศน์รังสีเอกซ์ของเนื้อเยื่อและเซลล์- โปรดระบุรายละเอียดต่อไปนี้เกี่ยวกับวิธีการนี้:
กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพที่มีสปอตไลท์สามารถเลื่อนสปอตไลท์ขึ้นและลงเพื่อให้ได้ความสว่างปานกลาง และสามารถเปลี่ยนรูรับแสงของรูรับแสงแบบปรับได้เพื่อให้ได้ความสว่างปานกลาง หากแสงมาจากดวงอาทิตย์ก็สามารถยกสปอตไลท์ได้อย่างเหมาะสมและสามารถขยายรูรับแสงของแสงที่แปรผันได้อย่างเหมาะสม หากแสงสว่างจ้าเกินไปก็สามารถลดสปอตไลท์ลงได้อย่างเหมาะสมและสามารถปรับลดรูรับแสงของทางแยกได้อย่างเหมาะสม หากคุณยังคงรู้สึกตื่นตาตื่นใจในสถานการณ์นี้ คุณสามารถเลือกวางฟิลเตอร์ที่เหมาะสมไว้บนตัวยึดใต้สปอตไลท์ได้ ไม้โอ๊คนี้สามารถให้ความสว่างที่ตรงใจคุณได้ แน่นอนว่าการปรับตำแหน่งบนและล่างของสปอตไลท์สามารถเปลี่ยนขนาดรูรับแสงของการอ่านแสงและเลือกฟิลเตอร์ที่เหมาะสมได้ ซึ่งต้องใช้การฝึกฝนและประสบการณ์เป็นระยะเวลาหนึ่ง
ปัญหาที่สำคัญมากในกล้องจุลทรรศน์ชีวภาพคือกระบวนการสุ่มตัวอย่างและแยกเซลล์ หลังจากการแช่แข็ง-การทำให้แห้งและการฝังเรซิน (FD) ส่วนที่บางเฉียบพิเศษที่แช่แข็ง-จะต้องได้รับการประมวลผลอย่างระมัดระวังเพื่อให้แน่ใจว่าองค์ประกอบ 65 องค์ประกอบของแต่ละส่วนจะไม่ได้รับความเสียหายในระหว่างการสังเกตและการวิเคราะห์ เนื่องจากมีขั้นตอนมากมายและมีค่าใช้จ่ายสูงในการวิเคราะห์ด้วยรังสีเอกซ์- จึงเป็นเรื่องน่าเสียใจที่จะสรุปผลไม่ถูกต้อง หากเซลล์ที่วิเคราะห์ได้รับความเสียหายหรือตายหลังจากการประมวลผลหลายขั้นตอนเป็นเวลานานและ- เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจที่แยกจากกันด้วยการบำบัดด้วยเจลติเนสมีสองรูปแบบ รูปแบบหนึ่งเป็นรูปแท่งยาว- และอีกรูปแบบเป็นรูปทรงกลม อย่างหลังหมายถึงเซลล์ที่กำลังจะตายซึ่งได้รับความเสียหายระหว่างกระบวนการแยกเซลล์
ปริมาณและการกระจายของอิเล็กโทรไลต์ในเซลล์ทั้งสองประเภทนี้มีความแตกต่างกันมากเมื่อดูด้วยกล้องจุลทรรศน์ชีวภาพ Na สูงมาก และ K ต่ำมากในคาร์ดิโอไมโอไซต์แบบวงกลม และความเข้มข้นของ Ca ในเดนไดรต์เชิงเส้นนั้นสูงมาก หลังจากการตรวจสอบด้วยวิธีการวิเคราะห์อื่นๆ แล้ว ได้รับการพิสูจน์แล้วว่า Na สูงและ K ต่ำในเซลล์ทรงกลม และ Ca ที่สูงในไมโตคอนเดรีย เป็นผลมาจากความเสียหายของเมมเบรนในระหว่างการแยกเซลล์ วิธีการตรึงเซลล์และเนื้อเยื่อด้วยความเย็นมักเกี่ยวข้องกับการทำให้เย็นลงก่อนแล้วจึงเก็บไว้ในไนโตรเจนเหลว การตรึงตรึงเป็นสิ่งสำคัญสำหรับผลการเก็บรักษา เซลล์ที่มีชีวิตหรือเนื้อเยื่อสดอุดมไปด้วยน้ำ และเมื่อดับแล้ว ส่วนของเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่สัมผัสโดยตรงกับสารทำความเย็น (โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อใช้ไนโตรเจนเหลวในการทำความเย็น) มักจะถูกแช่แข็งและตรึงไว้ก่อน ก่อตัวเป็น "เปลือก" ที่ขัดขวางส่วนกลางของเซลล์จากการถูกบดอัดและตรึง ดังนั้น เมื่อทำการวิเคราะห์ระดับจุลภาคด้วยรังสีเอกซ์- มักจะพบว่ามีผลึกน้ำแข็งอยู่ในส่วนกลางของเซลล์ขนาดใหญ่ เพื่อป้องกันไม่ให้สถานการณ์เช่นนี้เกิดขึ้น สารที่มีจุดหลอมเหลวสูงกว่าไนโตรเจนเหลว แต่ต่ำกว่า 806c จะถูกนำมาใช้เป็นสารทำความเย็น มีสารเหล่านี้อยู่หลายชนิด แต่หาได้ง่ายและราคาไม่แพงที่สุดคือโพรเพนเข้มข้น (จุดเดือด 42.120c จุดหลอมเหลว 187.10c น้ำหนักโมเลกุล 44.1) ซึ่งมีอัตราการเย็นตัวที่รวดเร็วเช่นกัน แต่ข้อเสียคือมันติดไฟได้
