วิธี MERGE สำหรับการถ่ายภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์
เรามักจะเห็นภาพถ่ายเรืองแสงที่นำเสนอในบทความเป็นการผสานกัน ดังที่แสดงด้านล่าง ด้วยการผสาน คุณสามารถแยกแยะได้ว่าสัญญาณฟลูออเรสเซนต์สองสัญญาณ (หรือมากกว่า) ที่ตำแหน่งเดียวกันในเนื้อเยื่อหรือเซลล์ซ้อนทับกันหรือไม่ วันนี้เราจะมาพูดถึงวิธีการผสานภาพถ่ายจากกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์กัน
1 หลักการพื้นฐาน
หลักการพื้นฐานคือการคำนวณข้อมูลสีของพิกเซลเดียวกันใหม่ในภาพถ่ายที่มีขนาดเท่ากันสองภาพ (หรือมากกว่า) ตามสูตรเพื่อให้ได้สีใหม่ ตัวอย่างเช่น สีแดงและสีเขียวของภาพถ่ายฟลูออเรสเซนต์ซ้อนทับกันจนกลายเป็นสีเหลือง อัลกอริธึมนี้ใช้ RGB "โหมดเพิ่มสี" (ดังที่แสดงด้านล่าง) และโหมดเลเยอร์ฟิวชั่นของ Photoshop "การเลื่อนสี" เกือบจะเหมือนกัน
2 แนะนำซอฟต์แวร์
วันนี้เราขอแนะนำการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ในซอฟต์แวร์ทั่วไป: ImageJ ซึ่งรวมภาพถ่ายได้มากกว่า Ps นั้นง่ายกว่าและตรงกว่า (ไม่สนใจเลเยอร์ โหมดเลเยอร์) ImageJ ไม่จำเป็นต้องติดตั้ง ซอฟต์แวร์สามารถทำได้แม้กระทั่ง เปิดบนแท่ง USB เพื่อใช้งาน
มีสองวิธีในการรวมภาพถ่ายฟลูออเรสเซนต์ วิธีแรกคือรวมเข้ากับซอฟต์แวร์ที่มาพร้อมกับกล้องจุลทรรศน์ และวิธีที่สองคือบันทึกภาพถ่ายฟลูออเรสเซนต์ในขอบเขตการมองเห็นเดียวกันด้วยไฟกระตุ้นที่แตกต่างกัน จากนั้นจึงรวมเข้ากับวิธีปกติ ซอฟต์แวร์ประมวลผลภาพ (เช่น PS) เมื่อนำเสนอผลลัพธ์ หากคุณกังวลเกี่ยวกับการดับของแสงฟลูออเรสเซนซ์เมื่อดูกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ (โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อย้อมด้วยสีย้อมฟลูออเรสเซนต์) คุณสามารถถ่ายภาพจำนวนมากได้อย่างรวดเร็ว จากนั้นเลือกภาพที่ต้องการ นั่นเป็นสิ่งที่ดีเมื่อกลับไป เมื่อดูกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ หากคุณกังวลเกี่ยวกับการดับของฟลูออเรสเซนซ์ (โดยเฉพาะอย่างยิ่งกับการย้อมสีฟลูออเรสเซนต์) คุณสามารถถ่ายภาพจำนวนมากก่อน จากนั้นจึงย้อนกลับและรวมภาพที่ดีสำหรับการนำเสนอผลลัพธ์ ในกรณีนี้ วิธีที่สองอาจยืดหยุ่นและสะดวกสบายกว่า
