ทักษะและวิธีการใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์
พารามิเตอร์ทางเทคนิคของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ 1. ช่องมองภาพมุมกว้าง 2. วัตถุประสงค์ไม่มีสี 3. ตัวแปลงวัตถุประสงค์สี่รู 4. อุปกรณ์เรืองแสงเปล่งแสงสีน้ำเงิน (b) สีเขียว (g) ระบบกระตุ้น 10หลอดปรอท 0W 5. โคแอกเซียลหยาบ กลไกการโฟกัสแบบไมโคร: ระยะโฟกัส 15 มม., ค่าไมโครกริด 0.002 มม. 6. ระยะการเคลื่อนที่ตามยาวของโต๊ะทำงานแบบกลไกสองชั้น: 70 มม., ระยะการเคลื่อนที่ด้านข้าง: 50 มม.
ทักษะและวิธีการใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์
(1) สไลด์แก้ว
ความหนาของสไลด์ควรอยู่ระหว่าง 0.8-1.2 มม. ถึง 1.2 มม. สไลด์ที่หนาเกินไปจะไม่ดูดซับแสงมากนักในมือข้างหนึ่ง และจะไม่ทำให้แสงกระตุ้นรวมตัวกันที่ชิ้นงานอีกด้านหนึ่ง สไลด์จะต้องเรียบ มีความหนาสม่ำเสมอ และไม่มีการเรืองแสงที่เกิดขึ้นเองอย่างเห็นได้ชัด บางครั้งจำเป็นต้องใช้สไลด์แก้ว Shi Ying
(2) ฝาครอบกระจก
กระจกครอบมีความหนาและเรียบประมาณ 0.17 มม. เพื่อเพิ่มแสงกระตุ้น ยังสามารถใช้กระจกครอบการแทรกแซงซึ่งเป็นกระจกครอบชนิดพิเศษที่มีสารหลายชั้น (เช่นแมกนีเซียมฟลูออไรด์) ซึ่งมีผลการรบกวนที่แตกต่างกันต่อความยาวคลื่นของแสงที่แตกต่างกัน มันสามารถทำให้เรืองแสงผ่านไปได้อย่างราบรื่นและสะท้อนแสงกระตุ้น และแสงกระตุ้นที่สะท้อนนี้สามารถกระตุ้นชิ้นงานได้
(3) ตัวอย่าง
ส่วนเนื้อเยื่อหรือตัวอย่างอื่นๆ ไม่ควรหนาเกินไป หากมีความหนาเกินไป แสงกระตุ้นส่วนใหญ่จะถูกใช้ไปที่ส่วนล่างของชิ้นงานทดสอบ ในขณะที่ส่วนบนที่เลนส์ใกล้วัตถุสังเกตได้โดยตรงจะไม่ตื่นเต้นเต็มที่ นอกจากนี้ การทับซ้อนกันของเซลล์หรือการมาสก์สิ่งเจือปนยังส่งผลต่อการตัดสินอีกด้วย
(4) สารปิดผนึก
กลีเซอรอลมักใช้เป็นสารปิดผนึกซึ่งจะต้องไม่มีสีและโปร่งใสโดยไม่ต้องเรืองแสงเอง ความสว่างของฟลูออเรสเซนต์จะสว่างที่ pH 8.5 ~ 9.5 และไม่จางง่ายอย่างรวดเร็ว ดังนั้น ส่วนผสมที่เท่ากันของกลีเซอรอลและ 0.5 โมล/ลิตร PH9.0 ~ 9.5 บัฟเฟอร์คาร์บอเนตจึงมักใช้เป็นสารปิดผนึก
(5) น้ำมันกระจก
โดยทั่วไป จะต้องใช้น้ำมันกระจกในการสังเกตตัวอย่างด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์สนามมืดและกระจกน้ำมัน ควรใช้น้ำมันกระจกชนิดพิเศษที่ไม่เรืองแสง หรือใช้กลีเซอรีนข้างต้นแทนได้ สามารถใช้พาราฟินเหลวได้ แต่ดัชนีการหักเหของแสงต่ำ ซึ่งมีผลกระทบเล็กน้อยต่อคุณภาพของภาพ
