ความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์แบบคอนโฟคอลแบบเลเซอร์กับกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบบดั้งเดิม
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบสแกนด้วยเลเซอร์ Confocal เป็นเครื่องมือวิเคราะห์ทางชีววิทยาระดับโมเลกุลและเซลล์ที่ค่อนข้างก้าวหน้า ซึ่งใช้คอมพิวเตอร์ เลเซอร์ และเทคโนโลยีการประมวลผลภาพเพื่อให้ได้ข้อมูลสามมิติของตัวอย่างทางชีววิทยา ส่วนใหญ่จะใช้ในการสังเกตโครงสร้างของเซลล์ที่มีชีวิตและการเปลี่ยนแปลงทางชีววิทยาของโมเลกุลและไอออนที่เฉพาะเจาะจง การวิเคราะห์เชิงปริมาณ และการหาปริมาณแบบเรียลไทม์
หลักการของเลเซอร์คอนโฟคอลไมโครสโคป: ใช้รูเข็มส่องสว่างที่อยู่ด้านหลังแหล่งกำเนิดแสงและรูเข็มตรวจจับที่อยู่ด้านหน้าเครื่องตรวจจับเพื่อให้เกิดการส่องสว่างเฉพาะจุดและการตรวจจับจุด แสงที่ปล่อยออกมาจากแหล่งกำเนิดแสงผ่านรูเข็มส่องสว่างจะโฟกัสที่จุดหนึ่งบนระนาบโฟกัสของตัวอย่าง และแสงเรืองแสงที่ปล่อยออกมาจากจุดนี้จะถูกถ่ายภาพบนรูเข็มตรวจจับ และแสงที่ปล่อยออกมานอกจุดนี้จะถูกบล็อกโดยการตรวจจับ รูเข็ม รูเข็มส่องสว่างและรูเข็มตรวจจับถูกเชื่อมต่อเข้ากับจุดที่ฉายรังสีหรือจุดที่ตรวจพบ ดังนั้นจุดที่ตรวจจับได้คือจุดคอนโฟคอล และระนาบที่ตำแหน่งของจุดที่ตรวจพบคือระนาบคอนโฟคอล
คอมพิวเตอร์จะแสดงจุดที่ตรวจพบบนหน้าจอคอมพิวเตอร์ในรูปแบบของจุดรูปภาพ เพื่อสร้างภาพที่สมบูรณ์ ระบบการสแกนในเส้นทางแสงจะสแกนบนระนาบโฟกัสของตัวอย่างเพื่อสร้างภาพคอนโฟคอลที่สมบูรณ์ ตราบใดที่สเตจเลื่อนขึ้นและลงตามแกน Z เลเยอร์ใหม่ของตัวอย่างจะถูกย้ายไปยังระนาบคอนโฟคอล และเลเยอร์ใหม่ของตัวอย่างจะถูกสร้างภาพบนจอภาพ ด้วยการเคลื่อนที่อย่างต่อเนื่องของแกน Z ทำให้ได้ภาพต่อเนื่องของเลเยอร์ต่างๆ ของตัวอย่าง ภาพตัดแสง
ความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบบดั้งเดิม
กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงแบบดั้งเดิมมีข้อบกพร่องที่ผ่านไม่ได้: โครงสร้างเรืองแสงนอกระนาบโฟกัสจะเบลอและพร่ามัว เหตุผลก็คือตัวอย่างทางชีววิทยาส่วนใหญ่มีโครงสร้างที่ทับซ้อนกัน หากโครงสร้างที่ติดฉลากเรืองแสงกระจายในระดับต่างๆ และซ้อนทับกัน เลนส์ใกล้วัตถุจะรับแสงเรืองแสงที่กระจัดกระจายจากด้านบนหรือด้านล่างระนาบโฟกัสด้วย และความละเอียดของกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงจะดีขึ้นอย่างมาก ลด.
บนพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบบดั้งเดิม กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ใช้แสงเลเซอร์เป็นแหล่งกำเนิดแสง ใช้หลักการและอุปกรณ์ของการโฟกัสแบบคอนจูเกต และใช้คอมพิวเตอร์ในการประมวลผลภาพดิจิทัล การสังเกต การวิเคราะห์ และผลลัพธ์ของวัตถุที่สังเกต ตัวอย่างสามารถสแกนและถ่ายภาพด้วยโทโมกราฟิกสำหรับการสังเกตและวิเคราะห์โครงสร้างเชิงพื้นที่สามมิติของเซลล์แบบไม่ทำลาย ในขณะเดียวกัน การใช้โพรบการติดฉลากด้วยอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์และไอออนฟลูออเรสเซนต์ เทคโนโลยีนี้ไม่เพียงแต่สามารถสังเกตเซลล์และเนื้อเยื่อคงที่เท่านั้น แต่ยังทำการสังเกตแบบไดนามิกแบบเรียลไทม์และตรวจจับโครงสร้าง โมเลกุล ไอออน และกิจกรรมชีวิตของเซลล์ที่มีชีวิต ในระดับเซลล์ย่อย การสังเกตสัญญาณทางสรีรวิทยา เช่น Ca2 บวก ค่า pH ศักยภาพของเยื่อหุ้มเซลล์ และการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ ได้กลายเป็นเครื่องมือวิจัยที่มีประสิทธิภาพรุ่นใหม่ในด้านสัณฐานวิทยา ชีววิทยาเซลล์ระดับโมเลกุล ประสาทวิทยาศาสตร์ เภสัชวิทยา และพันธุศาสตร์
