หลักการและลักษณะโครงสร้างของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์

Apr 03, 2023

ฝากข้อความ

หลักการและลักษณะโครงสร้างของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์

 

กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ใช้จุดที่มีประสิทธิภาพการส่องสว่างสูงเพื่อฉายแสงความยาวคลื่นหนึ่ง (เช่น แสงอัลตราไวโอเลต 3650 นิ้ว หรือแสงสีน้ำเงินม่วง 4200 นิ้ว) ผ่านระบบกรองสีเป็นแสงกระตุ้น และกระตุ้นสารเรืองแสงในตัวอย่างให้เปล่งแสงต่างๆ สีของการเรืองแสง หลังจากนั้น จะสังเกตได้จากการขยายของเลนส์ใกล้วัตถุและเลนส์ใกล้ตา ด้วยวิธีนี้ จึงง่ายต่อการจดจำแม้ว่าแสงฟลูออเรสเซนซ์จะอ่อนมากเมื่อเทียบกับพื้นหลังที่เข้มและมีความไวแสงสูง ส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการศึกษาโครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์ ตลอดจนองค์ประกอบทางเคมี โครงสร้างพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ประกอบด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงทั่วไปพร้อมอุปกรณ์เสริม เช่น แหล่งกำเนิดแสงฟลูออเรสเซนต์ ฟิลเตอร์กระตุ้น ตัวแยกลำแสงไดโครอิก และฟิลเตอร์ปิดกั้น แหล่งกำเนิดแสงฟลูออเรสเซนต์โดยทั่วไปใช้หลอดปรอทความดันสูงพิเศษ (50-200W) ซึ่งสามารถเปล่งแสงที่มีความยาวคลื่นต่างๆ ได้ อย่างไรก็ตาม สารเรืองแสงแต่ละชนิดมีความยาวคลื่นแสงกระตุ้นที่ก่อให้เกิดการเรืองแสงที่แรงที่สุด ดังนั้นจึงจำเป็นต้องเพิ่มตัวกรองการกระตุ้น (โดยทั่วไปคือตัวกรองกระตุ้นรังสีอัลตราไวโอเลต สีม่วง สีน้ำเงิน และสีเขียว) เพื่อให้แสงกระตุ้นมีความยาวคลื่นบางช่วงเจาะทะลุและฉายรังสีได้ ชิ้นงานในขณะที่ดูดซับแสงอื่นทั้งหมด หลังจากได้รับการฉายรังสีด้วยแสงกระตุ้น สารแต่ละชนิดจะปล่อยแสงเรืองแสงที่มองเห็นได้นานกว่าความยาวคลื่นที่ฉายรังสีในเวลาอันสั้น ฟลูออเรสเซนต์มีความเฉพาะเจาะจงและโดยทั่วไปจะอ่อนกว่าแสงกระตุ้น ในการสังเกตการเรืองแสงเฉพาะ จำเป็นต้องเพิ่มการปิดกั้น (หรือการยับยั้ง) ด้านหลังเลนส์ใกล้วัตถุและใช้ร่วมกับ

ความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงและกล้องจุลทรรศน์ธรรมดา
1. วิธีการให้แสงมักจะเป็นแบบลำแสงตก ซึ่งแหล่งกำเนิดแสงจะฉายไปยังตัวอย่างผ่านเลนส์ใกล้วัตถุ
2.แหล่งกำเนิดแสงคือแสงอัลตราไวโอเลตที่มีความยาวคลื่นสั้นกว่าและมีความละเอียดสูงกว่ากล้องจุลทรรศน์ธรรมดา
3.มีฟิลเตอร์พิเศษสองอัน อันหนึ่งอยู่ด้านหน้าแหล่งกำเนิดแสงใช้เพื่อกรองแสงที่มองเห็น และอีกอันระหว่างเลนส์ใกล้ตาและเลนส์ใกล้วัตถุใช้เพื่อกรองรังสีอัลตราไวโอเลตเพื่อปกป้องดวงตามนุษย์

กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ยังเป็นกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงชนิดหนึ่งด้วย ความแตกต่างที่สำคัญคือความยาวคลื่นกระตุ้นที่แตกต่างกัน สิ่งนี้กำหนดความแตกต่างในโครงสร้างและการใช้งานระหว่างกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์และกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงธรรมดา

กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงเป็นเครื่องมือพื้นฐานสำหรับไซโตเคมีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ ประกอบด้วยส่วนประกอบหลัก เช่น แหล่งกำเนิดแสง ระบบแผ่นกรอง และระบบออปติก ใช้แสงความยาวคลื่นหนึ่งเพื่อกระตุ้นตัวอย่างให้เปล่งแสงฟลูออเรสเซนต์ และขยายแสงผ่านเลนส์ใกล้วัตถุและระบบช่องมองภาพเพื่อสังเกตภาพเรืองแสงของตัวอย่าง

 

4 Microscope

 

ส่งคำถาม