โครงสร้างพิเศษของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ประกอบด้วย:
(I) ระบบกรองสี
ฟิลเตอร์สีเป็นส่วนสำคัญของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ ซึ่งเป็นส่วนประกอบหลักโดยฟิลเตอร์แสงกระตุ้น (ฟิลเตอร์กั้นแรก) ฟิลเตอร์ปล่อยแสง (ฟิลเตอร์กั้นที่สอง) และองค์ประกอบแบบกึ่งโปร่งใสและป้องกันฟิลเตอร์ครึ่งหนึ่ง (กระจกแยกลำแสง) . ผู้ผลิตฟิลเตอร์สีหลายรุ่นชื่อมักไม่เหมือนกัน
1. ตัวกรองแสงกระตุ้นและตัวกรองแสงการปล่อย: ตามแหล่งกำเนิดแสงและลักษณะของฟลูออโรโครม มักจะเลือกการจับคู่สามประเภทต่อไปนี้ เพื่อให้ช่วงความยาวคลื่นที่แน่นอนของแสงกระตุ้น และทำให้ตัวอย่างการกระตุ้นของเรืองแสงผ่าน ช่องมองภาพเพื่อการถ่ายภาพ
การกระตุ้นด้วยรังสียูวี: ตัวกรองแสงกระตุ้นช่วยให้สามารถส่งผ่านแสง UV และปิดกั้นการผ่านของแสงที่มองเห็นได้มากกว่า 400 นาโนเมตร ตัวกรองการปล่อยก๊าซที่สอดคล้องกันช่วยให้แสงสีฟ้าผ่านได้ ซึ่งจะปรากฏเป็นสีน้ำเงินในขอบเขตการมองเห็น เช่น สำหรับการย้อมสี DAPI
การกระตุ้นด้วยแสงสีน้ำเงิน: ตัวกรองแสงกระตุ้นช่วยให้แสงสีน้ำเงินทะลุผ่านได้ และปิดกั้นความยาวคลื่นอื่นๆ ของแสง ตัวกรองการปล่อยก๊าซที่สอดคล้องกันช่วยให้แสงสีเขียวผ่านได้ เช่น สำหรับเครื่องหมายการย้อมสี GFP
การกระตุ้นสีเขียว: ตัวกรองการกระตุ้นช่วยให้แสงสีเขียวผ่านได้ และปิดกั้นความยาวคลื่นอื่นๆ ตัวกรองการปล่อยก๊าซที่สอดคล้องกันมักจะยอมให้แสงสีแดงผ่านได้ เช่น การย้อมสีโรดามีน
2. ฟิลเตอร์กึ่งโปร่งใสและกึ่งสะท้อนแสง: บทบาทของมันคือปิดกั้นการกระตุ้นของแสงผ่านการสะท้อนอย่างสมบูรณ์ และผ่านช่วงความยาวคลื่นที่สอดคล้องกันของแสงที่ปล่อยออกมา รูปแบบและการกระตุ้นของตัวกรองแสงและการปล่อยของตัวกรองแสงสอดคล้องกัน
(B) เลนส์ใกล้วัตถุและช่องมองภาพ
สามารถใช้เลนส์ใกล้วัตถุได้หลากหลาย แต่ * ทางเลือกที่ดีของเลนส์ใกล้วัตถุแบบสมมาตรและไม่มีสี เนื่องจากออโตฟลูออเรสเซนต์มีขนาดเล็กมากและมีคุณสมบัติการส่งผ่านแสง (ช่วงความยาวคลื่น) เหมาะสำหรับการเรืองแสง เนื่องจากความสว่างของแสงฟลูออเรสเซนต์ของภาพในมุมมองของกล้องจุลทรรศน์เป็นสัดส่วนกับกำลังสองของอัตราปากกระบอกปืนของวัตถุ และแปรผกผันกับกำลังขยาย ดังนั้นเพื่อปรับปรุงความสว่างของภาพเรืองแสง วัตถุที่มีอัตราปากกระบอกปืนขนาดใหญ่ควร ถูกนำมาใช้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับตัวอย่างเรืองแสงที่ไม่แข็งแรงเพียงพอ ควรใช้อัตราปากที่ใหญ่ วัตถุประสงค์ในการส่งผ่านแสงสูง โดยให้ช่องมองภาพต่ำที่สุด
(C) อุปกรณ์ออปติคัลอื่น ๆ
แผ่นสะท้อนแสง โดยทั่วไปชั้นสะท้อนแสงจะเคลือบด้วยอะลูมิเนียม เนื่องจากอลูมิเนียมบนรังสีอัลตราไวโอเลตและการดูดกลืนแสงที่มองเห็นได้ของบริเวณสีน้ำเงิน-ม่วงน้อยกว่า โดยสะท้อนแสงได้มากถึง 90% หรือมากกว่า (ในขณะที่การสะท้อนแสงของเงินมีเพียง 70%) โดยทั่วไปจะใช้แผ่นสะท้อนแสงแบบแบน กระจกสปอตไลท์ ออกแบบและผลิตโดยเฉพาะสำหรับกระจกสปอตไลท์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ ที่ทำจากแก้วควอทซ์หรือกระจกใสยูวีอื่นๆ อุปกรณ์แสงตกซึ่งนอกเหนือจากการทำงานของแหล่งกำเนิดแสงที่ส่งแล้ว ยังเหมาะสำหรับชิ้นงานที่ทึบแสงและโปร่งแสง เช่น ฟิล์มหนา เมมเบรนกรอง อาณานิคม การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ และตัวอย่างอื่นๆ สำหรับการสังเกตโดยตรง ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา การพัฒนากล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ชนิดใหม่โดยใช้อุปกรณ์ตกแสง เรียกว่า กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ล้ม
(ง) แหล่งกำเนิดแสง
ปัจจุบันมีการใช้หลอดปรอทความดันสูง 50 หรือ 100 วัตต์เป็นแหล่งกำเนิดแสง ทำงานโดยการปล่อยอิเล็กโทรดทั้งสองซึ่งเกิดจากการระเหยของปรอท ลูกบอลความดันอากาศจะเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว (กระบวนการนี้โดยทั่วไปจะใช้เวลาประมาณ 5 ~ 15 นาที) และในกระบวนการปล่อยควอนตัมแสง ความยาวคลื่นของแสงที่ปล่อยออกมาจะเพียงพอที่จะกระตุ้น สารเรืองแสงทุกประเภท ดังนั้น สำหรับกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์จึงมักใช้
หลอดปรอทมีอายุการใช้งานค่อนข้างสั้น โดยปกติคือ 200 ชั่วโมง และเพื่อตอบสนองต่อข้อจำกัดด้านอายุการใช้งานนี้ ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา X-Cite แหล่งกำเนิดแสงฟลูออเรสเซนต์ชนิดใหม่ จึงถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายโดยมีอายุการใช้งานหลอดไฟยาวนานถึง 2000 ชั่วโมงและการใช้งานที่ยืดหยุ่น - ไม่จำเป็นต้องอุ่นเครื่อง และพร้อมใช้งานทันทีที่แกะออกจากกล่อง
