กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพแบบตั้งตรง

กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพแบบตั้งตรง

หลักการของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์คือการใช้แหล่งกำเนิดแสงจุดที่มีประสิทธิภาพสูง (เช่นหลอดปรอทความดันสูงพิเศษ) เพื่อปล่อยความยาวคลื่นบางอย่างของแสง (เช่นแสงอัลตราไวโอเลต 3650 λหรือแสงสีฟ้าสีม่วง 4200 λ) ผ่านระบบกรองสี จากนั้นจะถูกกรองโดยตัวกรองการปิดกั้น (หรือระงับ) ด้านหลังเลนส์วัตถุประสงค์และสังเกตได้ผ่านเอฟเฟกต์การขยายของช่องมองภาพ

ตัวกรองการปิดกั้นมีสองฟังก์ชั่น: ประการแรกมันดูดซับและบล็อกแสงกระตุ้นจากการเข้าสู่ช่องมองภาพเพื่อหลีกเลี่ยงการรบกวนด้วยการเรืองแสงและทำให้ดวงตาเสียหาย ประการที่สองคือการเลือกและอนุญาตให้ฟลูออเรสเซนต์เฉพาะผ่านแสดงสีเรืองแสงที่เฉพาะเจาะจง

กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์สามารถแบ่งออกเป็นสองประเภทตามหลักการของเส้นทางแสง:

1. กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงเกียร์
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์รุ่นเก่าใช้สปอตไลท์เพื่อกระตุ้นการเรืองแสงโดยผ่านแหล่งกำเนิดแสงกระตุ้นผ่านวัสดุตัวอย่าง ข้อได้เปรียบของมันคือการเรืองแสงที่แข็งแกร่งที่กำลังขยายต่ำ แต่ข้อเสียของมันคือการเรืองแสงของมันลดลงเมื่อเพิ่มการขยาย ดังนั้นจึงเหมาะสำหรับการสังเกตวัสดุตัวอย่างที่ใหญ่ขึ้นเท่านั้น

2. กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงที่ลดลง
แสงกระตุ้นลดลงจากเลนส์วัตถุประสงค์บนพื้นผิวของชิ้นงานโดยใช้เลนส์วัตถุประสงค์เดียวกับคอนเดนเซอร์ส่องสว่างและเลนส์วัตถุประสงค์สำหรับการรวบรวมเรืองแสง

ตัวแยกลำแสงคู่ (กระจก dichroic) จะต้องเพิ่มลงในเส้นทางออปติคัลซึ่งเป็นมุม 45 องศาด้วยแกนออปติคัล แสงกระตุ้นจะสะท้อนลงในเลนส์วัตถุประสงค์และมุ่งเน้นไปที่ตัวอย่าง ฟลูออเรสเซนต์ที่สร้างขึ้นโดยตัวอย่างเช่นเดียวกับแสงกระตุ้นที่สะท้อนจากพื้นผิวของเลนส์วัตถุประสงค์และกระจกฝาครอบเข้าสู่เลนส์วัตถุประสงค์ในเวลาเดียวกันและกลับไปที่ตัวแยกลำแสงคู่เพื่อแยกแสงกระตุ้นและฟลูออเรสเซนต์ ไฟกระตุ้นที่เหลือจะถูกบล็อกโดยการดูดซับตัวกรอง หากการรวมกันของตัวกรองการกระตุ้นที่แตกต่างกันตัวคานคานสีคู่และการปิดกั้นตัวกรองจะใช้พวกเขาสามารถตอบสนองความต้องการของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาฟลูออเรสเซนต์ที่แตกต่างกัน

ข้อดีของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์นี้คือการส่องสว่างของสนามที่สม่ำเสมอการถ่ายภาพที่ชัดเจนและการเรืองแสงที่แข็งแกร่งขึ้นพร้อมกับกำลังขยายที่ใหญ่ขึ้น