การใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง: เทคนิคและทักษะ
พารามิเตอร์ทางเทคนิคของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ 1. เลนส์ใกล้ตามุมกว้าง 2. เลนส์ใกล้วัตถุไม่มีสี 3. ตัวแปลงเลนส์ใกล้วัตถุสี่รู 4. อุปกรณ์เรืองแสง Epi สีน้ำเงิน (B) สีเขียว (G) ระบบกระตุ้น 10หลอดปรอท 0 วัตต์ 5. กลไกการปรับโฟกัสหยาบและละเอียดแบบโคแอ็กเชียล: การปรับระยะโฟกัส: 15 มม. ค่ากริดการเคลื่อนไหวระดับไมโคร: 0.002 มม. 6. ตารางเชิงกลสองชั้นช่วงการเคลื่อนไหวตามยาว: 70 มม. ช่วงการเคลื่อนไหวด้านข้าง: 50 มม.
ใช้วิธีทักษะ
(1) สไลด์แก้ว
ความหนาของกระจกสไลด์ควรอยู่ระหว่าง 0.8 ถึง 1.2 มม. สไลด์ที่หนาเกินไปจะดูดซับแสงได้มากกว่าในด้านหนึ่ง และในทางกลับกัน แสงกระตุ้นไม่สามารถรวมอยู่ที่ชิ้นงานได้ สไลด์ต้องเรียบ มีความหนาสม่ำเสมอ และปราศจากสารเรืองแสงอัตโนมัติ บางครั้งใช้สไลด์แก้วควอทซ์
(2) ครอบแก้ว
ความหนาของกระจกครอบประมาณ 0.17 มม. เรียบ เพื่อเสริมแสงกระตุ้น ยังสามารถใช้กระจกครอบกันคลื่นซึ่งเป็นกระจกครอบแบบพิเศษที่เคลือบด้วยสารหลายชั้น (เช่น แมกนีเซียมฟลูออไรด์) ที่มีผลรบกวนแสงที่มีความยาวคลื่นต่างกัน ซึ่งสามารถทำให้ เรืองแสงเป็นไปอย่างราบรื่น แสงที่น่าตื่นเต้นจะถูกส่งผ่านและสะท้อนออกมา และแสงกระตุ้นที่สะท้อนออกมานี้จะทำให้ชิ้นงานตื่นเต้น
(3) ชิ้นงานทดสอบ
ชิ้นเนื้อเยื่อหรือชิ้นงานอื่น ๆ ไม่ควรหนาเกินไป ถ้ามันหนาเกินไป แสงกระตุ้นส่วนใหญ่จะถูกใช้ที่ส่วนล่างของชิ้นงาน ในขณะที่ส่วนบนที่สังเกตโดยตรงจากเลนส์ใกล้วัตถุจะไม่ถูกกระตุ้นอย่างเต็มที่ นอกจากนี้เซลล์ที่ทับซ้อนกันหรือสิ่งเจือปนปกคลุมส่งผลต่อการตัดสิน
(4) ตัวแทนการติดตั้ง
โดยทั่วไปจะใช้กลีเซอรีนเป็นสารช่วยติด ซึ่งต้องไม่มีสารเรืองแสงอัตโนมัติ ไม่มีสีและโปร่งใส และความสว่างของสารเรืองแสงจะสว่างกว่าที่ pH 85-9.5 และไม่จางหายไปอย่างรวดเร็วโดยง่าย ดังนั้น ส่วนผสมที่เท่ากันของกลีเซอรอลและสารละลายบัฟเฟอร์คาร์บอเนต 0.5mol/l ที่มีค่า pH 9.0 ถึง 9.5 เท่ากันจึงมักใช้เป็นสารยึดติด
(5) น้ำมันกระจก
โดยทั่วไป เมื่อสังเกตชิ้นงานด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์สนามมืดและเลนส์สำหรับแช่น้ำมัน จะต้องใช้น้ำมันแช่ ทางที่ดีควรใช้น้ำมันแช่แบบพิเศษที่ไม่เรืองแสง สามารถใช้กลีเซอรีนข้างต้นแทนได้ และพาราฟินเหลวก็สามารถใช้ได้เช่นกัน แต่ค่าดัชนีการหักเหของแสงต่ำ ซึ่งมีผลกระทบต่อคุณภาพของภาพเล็กน้อย อิทธิพล.
