อะไรคือความแตกต่างระหว่างกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์และกล้องจุลทรรศน์กลับหัว
ในการเพาะเลี้ยงเซลล์และการทดลองอนุพันธ์ที่เกี่ยวข้อง กล้องจุลทรรศน์เป็นเครื่องมือที่สำคัญมาก ในปัจจุบันมีกล้องจุลทรรศน์หลายประเภทในท้องตลาด เป็นเรื่องท้าทายในการเลือกกล้องจุลทรรศน์ที่ตรงตามความต้องการและเหมาะสม ต่อไปนี้เป็นคำแนะนำเบื้องต้นเกี่ยวกับหลักการของกล้องจุลทรรศน์หัวกลับและกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ เพื่อให้คุณสามารถเลือกได้อย่างง่ายดาย
ส่วนประกอบของกล้องจุลทรรศน์กลับหัวจะเหมือนกับของกล้องจุลทรรศน์ทั่วไป ส่วนใหญ่ประกอบด้วยสามส่วน: ส่วนทางกล ส่วนแสง และส่วนแสง
ส่วนประกอบของกล้องจุลทรรศน์แบบกลับด้านจะเหมือนกับกล้องจุลทรรศน์แบบตั้งตรงทั่วไป ยกเว้นว่าเลนส์ใกล้วัตถุและระบบส่องสว่างจะกลับด้าน โดยอันแรกอยู่ใต้แท่น และอันหลังอยู่เหนือแท่น
โครงสร้างดังกล่าวสามารถขยายระยะห่างที่มีประสิทธิภาพระหว่างระบบรวมแสงกับเวทีได้อย่างมาก ซึ่งสะดวกสำหรับการวางวัตถุที่หนาขึ้นเพื่อให้สังเกตได้ เช่น จานเพาะเชื้อและขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ (แน่นอนว่ามีสไลด์แก้ว ฯลฯ ด้วย) และในขณะเดียวกันระยะห่างระหว่างเลนส์ใกล้วัตถุกับวัสดุ ระยะการทำงานระหว่างเลนส์ทั้งสองนั้นไม่จำเป็นต้องมาก
กล้องจุลทรรศน์หัวกลับใช้สำหรับการสังเกตจุลินทรีย์ เซลล์ แบคทีเรีย การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ สารแขวนลอย ตะกอน ฯลฯ ในหน่วยแพทย์และสุขภาพ สถาบันอุดมศึกษา และสถาบันวิจัย สามารถสังเกตกระบวนการสืบพันธุ์และการแบ่งตัวของเซลล์ แบคทีเรีย ฯลฯ ในอาหารเลี้ยงเชื้อได้อย่างต่อเนื่อง และสามารถถ่ายภาพรูปแบบใดก็ได้ในกระบวนการ
มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านเซลล์วิทยา ปรสิตวิทยา เนื้องอกวิทยา ภูมิคุ้มกันวิทยา พันธุวิศวกรรม จุลชีววิทยาอุตสาหกรรม พฤกษศาสตร์ และสาขาอื่นๆ
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ใช้เพื่อศึกษาการดูดซึมและการขนส่งสารในเซลล์ การกระจายและการแปลตำแหน่งของสารเคมี เป็นต้น
สำหรับวัตถุที่ตรวจสอบ มีสองวิธีในการสร้างการเรืองแสง: การเรืองแสงอัตโนมัติ ซึ่งจะปล่อยการเรืองแสงโดยตรงหลังจากฉายรังสีด้วยแสงอัลตราไวโอเลต
สารบางชนิดในเซลล์ เช่น คลอโรฟิลล์ จะผลิตสารเรืองแสงอัตโนมัติหลังจากถูกฉายรังสีอัลตราไวโอเลต แม้ว่าสารบางชนิดจะไม่สามารถเรืองแสงได้ แต่ก็สามารถเปล่งแสงทุติยภูมิได้หลังจากถูกย้อมด้วยสีย้อมเรืองแสงหรือแอนติบอดีเรืองแสงหลังจากฉายรังสีอัลตราไวโอเลต
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ใช้แหล่งกำเนิดแสงแบบจุดที่มีประสิทธิภาพการส่องสว่างสูงเพื่อปล่อยแสงที่มีความยาวคลื่นหนึ่ง (แสงอุลตราไวโอเลต 365 นาโนเมตรหรือแสงสีน้ำเงินม่วง 420 นาโนเมตร) ผ่านระบบกรองเป็นแสงกระตุ้น และหลังจากกระตุ้นสารเรืองแสงในชิ้นงานเพื่อเปล่งแสงเรืองแสงต่างๆ สี จากนั้นทำการสังเกตผ่านการขยายของเลนส์ใกล้วัตถุและเลนส์ใกล้ตา
ด้วยวิธีนี้ ภายใต้พื้นหลังที่มีคอนทราสต์สูง แม้ว่าฟลูออเรสเซนซ์จะอ่อนมาก แต่ก็สามารถระบุได้ง่ายและมีความไวสูง ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการวิจัยโครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์และองค์ประกอบทางเคมี
