วิธีการถ่ายภาพแสงจ้า-สนามและความมืด-ในสนามด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์

Jul 06, 2025

ฝากข้อความ

วิธีการถ่ายภาพแสงจ้า-สนามและความมืด-ในสนามด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์

 

(1) วิธีการถ่ายภาพสนามสว่าง (BFI) ซึ่งยอมให้ลำแสงอิเล็กตรอนที่ส่งผ่านในบริเวณพาราแอกเซียลผ่านช่องรับแสงได้เท่านั้น ทำให้เกิดภาพมืดบนพื้นหลังที่สว่าง ยิ่งรูรับแสงของรูรับแสงใกล้วัตถุมีขนาดเล็กลง ความเปรียบต่างของภาพในสนามที่สว่างก็จะยิ่งมากขึ้นเท่านั้น (2) การถ่ายภาพสนามมืด (DFI) เป็นเทคนิคที่ช่วยให้เพียงส่วนหนึ่งของลำแสงที่กระเจิงมุมกว้างหรือลำแสงการเลี้ยวเบนของคริสตัลบางส่วนผ่านช่องรับแสงวัตถุ ในขณะที่ปิดกั้นลำแสงที่ส่งผ่าน ซึ่งจะสร้างภาพกราฟิกที่สว่างบนพื้นหลังสีเข้ม วิธีการถ่ายภาพสนามมืดนี้สามารถปรับปรุงคอนทราสต์ของภาพได้และเป็นเทคนิคการถ่ายภาพที่สำคัญ


มีประมาณสี่วิธีเพื่อให้ได้ภาพสนามมืดโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ของ Leica: (1) รักษาการส่องสว่างในแนวตั้งตามแนวแกนแสงในขณะที่ขยับรูรับแสง; (2) การใช้แสงเฉียงเพื่อจับลำแสงที่กระจัดกระจายในทิศทางของแกนแสงเรียกว่าการถ่ายภาพสนามมืดส่วนกลาง (CDFI) (3) ช่องรับแสงใกล้วัตถุที่มีตัวหยุดลำแสงตรงกลางและพื้นที่โปร่งใสเป็นวงกลม (4) ใช้เลนส์คอนเดนเซอร์โปร่งใสทรงกลมสำหรับการตรวจจับแสงและรูรับแสงทรงกลมตรงกลางสำหรับเลนส์ใกล้วัตถุ วิธี * เป็นวิธีที่ง่ายที่สุด แต่ใช้การถ่ายภาพอิเล็กทรอนิกส์ในบริเวณปลอกส่วนปลาย ดังนั้นความคลาดเคลื่อนจึงมีมากและคุณภาพของภาพไม่ดีนัก วิธีที่สองสามารถหลีกเลี่ยงข้อเสียข้างต้นได้ แต่รูรับแสงใกล้วัตถุของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ Leica จะรับอิเล็กตรอนที่กระจัดกระจายเพียงส่วนเล็กๆ เท่านั้น ส่งผลให้ประสิทธิภาพลดลง ด้านข้างของรูรับแสงมักถูกโจมตีด้วยอิเล็กตรอนจำนวนมาก ซึ่งสามารถทำให้เกิดการปนเปื้อนที่ไม่สมมาตรได้ง่ายและส่งผลต่อคุณภาพของภาพ เลนส์ใกล้วัตถุวงแหวนได้รับการปรับปรุงในด้านนี้ แต่ข้อเสียคือสร้างได้ยากและยากที่จะบรรลุความสมมาตรตามแนวแกนโดยสมบูรณ์ เนื่องจากข้อกำหนดที่ค่อนข้างผ่อนคลายสำหรับระบบไฟส่องสว่าง จึงสามารถใช้โซลูชันหลังได้ ซึ่งเกี่ยวข้องกับการเพิ่มช่องรับแสงวงแหวนที่คอนเดนเซอร์เพื่อให้แสงสว่างแบบลำแสงกลวงสำหรับตัวอย่าง ผลกระทบของอุปกรณ์นี้ ความละเอียดของภาพสามารถใกล้เคียงกับภาพในสนามที่สว่าง ในขณะที่คอนทราสต์ได้รับการปรับปรุงอย่างมาก

 

3 Continuous Amplification Magnifier -

ส่งคำถาม