การใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงแบบกลับด้านอย่างเหมาะสม
กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับหัวเป็นกล้องจุลทรรศน์อเนกประสงค์ที่ใช้ใน-สาขาการวิจัยวิทยาศาสตร์ชีวภาพขั้นสูง โครงสร้างมันซับซ้อนและมีราคาแพง ดังนั้น เพื่อให้นักศึกษาระดับบัณฑิตศึกษาทางการแพทย์เชี่ยวชาญการปฏิบัติงานและข้อกำหนดการใช้งานของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับด้านได้อย่างถูกต้อง ครูจะต้องจัดหลักสูตรความรู้พื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับด้านก่อนจึงจะสาธิตการทำงานจริงของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับด้าน โดยแนะนำโครงสร้าง หลักการ ฟังก์ชัน และวิธีการใช้งานพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับด้าน จากนั้น ในการทำงานเฉพาะ จะมีการสาธิตการทำงานที่แตกต่างกันสำหรับชิ้นงานทดสอบที่แตกต่างกัน โดยค่อยๆ สร้างมาตรฐานการทำงานและการใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับหัวโดยนักศึกษาระดับบัณฑิตศึกษาทางการแพทย์
1. การใช้การสังเกตการมองเห็นที่ชัดเจนอย่างถูกต้อง หน้าที่หนึ่งของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับหัวคือการสังเกตสนามที่สว่าง หลักการพื้นฐานของมันคือ หลังจากที่ชิ้นงานถูกฉายรังสีด้วยแสง ชิ้นส่วนต่างๆ จะดูดซับแสงต่างกันเพื่อให้ได้ภาพในพื้นหลังที่สว่าง เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการสังเกตสิ่งส่งตรวจ เช่น เซลล์ที่เปื้อนและส่วนเนื้อเยื่อที่มีสีของตัวเองเป็นหลัก
2. การใช้การสังเกตผลต่างอย่างถูกต้อง ฟังก์ชั่นที่สองของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับหัวคือการสังเกตความแตกต่างของเฟส หลักการพื้นฐานของมันคือการแปลงความแตกต่างของเส้นทางแสงของส่วนต่างๆ ของตัวอย่างให้เป็นความแตกต่างของแอมพลิจูด ซึ่งสังเกตได้ผ่านเลนส์ใกล้วัตถุแบบ Phase Difference ที่มีแผ่นเฟสและเลนส์คอนเดนเซอร์ที่มีรูรับแสงทรงกลม เหมาะสำหรับการสังเกตเซลล์ที่มีชีวิตหรือส่วนเนื้อเยื่อที่ไม่มีรอยเปื้อนเป็นหลัก ในกระบวนการสอนเชิงทดลอง นอกเหนือจากการชี้แนะนักศึกษาแพทย์ให้ปฏิบัติตามวิธีการปฏิบัติงานพื้นฐานของการสังเกตความแตกต่างของเฟสอย่างถูกต้องแล้ว สิ่งสำคัญยิ่งกว่าคือต้องแนะนำให้พวกเขาเข้าใจและเชี่ยวชาญตัวอย่างชิ้นงานโดยใช้การสังเกตความแตกต่างของเฟส สำหรับพวกเขา วิธีการที่ใช้กันมากที่สุดในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ในอนาคตคือการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ของเซลล์เพาะเลี้ยง ประการแรก สำหรับการเลือกอุปกรณ์เซลล์ โดยทั่วไปแนะนำให้ใช้จาน จาน และขวดสำหรับการเพาะเลี้ยงแก้วและพลาสติก ส่วนใหญ่ไม่มีสีและโปร่งใส และสามารถสังเกตได้โดยตรงด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์แบบกลับด้าน โดยไม่จำเป็นต้องทิ้งของเหลวในเซลล์หรือผ่านการบำบัดอื่นๆ ประการที่สอง ในระหว่างการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ อย่าเปิดฝาของอุปกรณ์โดยไม่ตั้งใจเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนในเซลล์ สุดท้ายนี้ สำหรับผู้ปฏิบัติงานจำเป็นต้องสวมถุงมือ หน้ากาก และเสื้อคลุมสีขาว ซึ่งไม่เพียงแต่ปกป้องสุขภาพของตนเองเท่านั้น แต่ยังป้องกันการปนเปื้อนของเซลล์อีกด้วย
